论文部分内容阅读
目的制备载多西他赛的聚乳酸-羟基乙酸缓释微球（PLGA microspherescontaining docetaxel，PMCD），观察其形态、粒径、载药率、包封率、体外释放等，探讨超声引导下瘤内注射PMCD间质化疗抗乳腺癌裸鼠移植瘤作用及对多药耐药基因表达的影响。方法1、PMCD的制备与性质测定：采用乳化溶剂挥发法制备PMCD，扫描电镜观察微球的表面形态及粒径，高效液相色谱法测定包封率、载药率及体外药物释放情况。2、超声介导下PMCD瘤内注射治疗乳腺癌裸鼠移植瘤作用：建立荷人乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型，随机分为6组，每组5只，分别是模型组、空白微球组、多西他赛低剂量组、多西他赛高剂量组、PMCD低剂量组、PMCD高剂量组。乙醚吸入麻醉后，在超声引导下进行瘤内注射给予相应治疗。每周测量肿瘤大小，根据肿瘤体积绘制肿瘤生长曲线。给药后第35天，行彩色多普勒超声检查，观察肿瘤形态、内部回声、边界、血流信号等，而后处死裸鼠，剥离肿瘤计算肿瘤生长抑制率，病理组织学检查，荧光定量PCR检测肿瘤耐药基因MDR1、MRP、BCRP表达的变化。结果1、采用乳化溶剂挥发法制备的PMCD微球呈圆球形、表面光滑、分散良好，平均粒径为23.1μm，包封率为96.3%，载药率为4.82%，制备的PMCD在PBS释放平稳，第1天释放了7.2%，至第40天累积释放了85.7%，无明显突释效应。2、超声引导下PMCD瘤体内注射的抗肿瘤作用：2.1各实验组裸鼠移植瘤生长曲线显示模型组、空白微球组裸鼠瘤体体积明显增大，多西他赛低剂量组、多西他赛高剂量组、PMCD低剂量组移植瘤生长速度较缓慢，PMCD高剂量组移植瘤生长则明显受到抑制，体积小于其他各实验组。2.2治疗第35天彩色多普勒超声检查，PMCD高剂量组与其他各实验组比较，肿瘤明显缩小，血流信号减少。2.3PMCD高剂量组裸鼠肿瘤质量明显小于模型组，二者比较差异有非常显著性意义（P＜0.01），其肿瘤生长抑制率达65.7%，亦明显高于多西他赛低剂量组、高剂量组及PMCD低剂量组（P＜0.05）。2.4病理学检查模型组见细胞核大染色深，病理性核分裂相增多；多西他赛低剂量组、高剂量组与PMCD低剂量组肿瘤组织见坏死灶及癌灶并存；PMCD高剂量组肿瘤组织大片变性坏死，部分组织结构模糊不清。2.5荧光定量PCR结果，与模型组比较，多西他赛低剂量组肿瘤耐药基因MRD1表达明显上调（P＜0.05），PMCD高剂量组MRD1表达明显下调（P＜0.05），多西他赛低剂量组和PMCD高剂量组差异有统计学意义（P＜0.05），余各组间无明显差异。结论多西他赛缓释微球载药率、包封率高，体外释放平稳，超声引导下瘤内注射间质化疗具有明显抑制荷人乳腺癌裸鼠移植瘤作用，并且使乳腺癌多药耐药基因表达下调。