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目的:Nogo-A分子是近年来发现的存在于中枢神经白质,能抑制神经轴突再生的跨膜蛋白,其两个跨膜区之间存在一个66氨基酸的结构域,Nogo-66.目前已有研究证实,Nogo-66对神经细胞突起再生有明显的抑制作用,近年来对Nogo-66分子在中枢神经损伤后修复与再生中的研究已越来越引起人们的兴趣.该实验旨在通过克隆Nogo-66分子基因,构建原核表达载体,诱导表达并纯化得到Nogo-66融合蛋白;将融合蛋白免疫家兔,获得相应多克隆抗体,然后对融合蛋白和多克隆抗体进行初步生物学检测.为进一步探索Nogo-66在中枢神经损伤中的作用及其可能的干预措施打下良好的基础.结论:经基因工程诱导表达的Nogo-66融合蛋白具有免疫原性,将其作为抗原免疫家兔后制备的兔抗大鼠Nogo-66多克隆抗体,能够与大鼠脑、脊髓匀浆中的Nogo蛋白结合;同时研究结果表明该克隆表达的Nogo-66融合蛋白对PC12细胞突起生长有抑制作用,而制备的多克隆抗体能够阻断Nogo-66融合蛋白分子对PC12细胞突起生长的抑制作用,表明该研究制备的Nogo-66融合蛋白和相应抗体都具有良好的生物学活性.Nogo-66融合蛋白的成功表达和抗Nogo-66多抗的制备为中枢神经损伤后再生与修复的进一步研究奠定了坚实的实验基础.