【摘 要】
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该文探索完善的肝细胞培养条件,研究重组逆转录病毒载体有效转导大鼠原代肝细胞.采用原位两步灌流法和梯度离心法分离纯化肝细胞.对比表皮生长因子和肝细胞生长因子刺激肝细
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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该文探索完善的肝细胞培养条件,研究重组逆转录病毒载体有效转导大鼠原代肝细胞.采用原位两步灌流法和梯度离心法分离纯化肝细胞.对比表皮生长因子和肝细胞生长因子刺激肝细胞增殖的效应,并观察了肝细胞形态及酶的活性.以双顺反子逆转病毒载体(pGCEN/β-gal)转导经表皮生长因子刺激的肝细胞,用分子生物学方法和细胞化学方法检测出逆转录病毒载体携带的标记基因在肝细胞内的整合及表达.实验表明,在含表皮生长因子的原代肝细胞培养条件下,双顺反子逆转录病毒载体(pGCEN/β-gal)可将标记基因有效转移并表达于肝细胞,以此作为细胞标志物,有助于分析肝细胞移植后在体内的寿命、分布及功能,为临床开展肝细胞移植提供数据.
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