蓖麻凝集素（Ricinus Communis Agglutinin,RCA）是从蓖麻子中分离出来的一种具有生物活性的高分子蛋白,仅占蓖麻子的0.005-0.015%。它能专一性地与末端Galβ1-4Glc NAc糖链序列结合,在进入动物体后,会使血红蛋白发生凝集作用。其特异性结合糖的性质使之成为含糖链分子研究的理想探针之一。本研究主要利用RCA能专一性结合糖基分子的特性,探讨其作为探针,在固定化后应用于对血液中含糖蛋白的分离纯化、在酶化学修饰中的应用等。利用环氧氯丙烷法活化惰性载体凝胶Sepharose 4B,将从蓖麻子中纯化得到的RCA偶联在Sepharose 4B上使RCA固定,建立以RCA作为配基的RCA-Sepharose 4B亲和层析柱,偶联率达1.916mg/g或1.725mg/g。将RCA-Sepharose 4B亲和层析柱上的RCA作为探针与兔血浆中相关蛋白进行相互作用的接触,结果发现兔血浆中存在至少二种能与RCA起作用的多肽,SDS-PAGE结果显示这二种多肽的分子量分别为97KDa和120KDa。进一步的实验证实由RCA牵出的多肽都为含糖的能与RCA起相互作用的蛋白。本研究证明RCA-Sepharose 4B亲和层析柱在生化分离上,适用于在复杂的多组分生物样品中分离纯化出糖蛋白,也可作为探针很好的探索与RCA起相互作用的蛋白质。在利用末端胺化的半乳糖修饰蛋清溶菌酶（Lysozyme E C3.2.1.17,LYZ）上,把修饰的溶菌酶（Gal-LYZ）和未修饰的溶菌酶分离开来是非常难的,因为修饰前后酶分子量差别不大。本研究利用RCA-Sepharose 4B亲和层析的特点,成功地使用此亲和层析柱分离了两者,扩展了固定化RCA在生化研究中的应用,证明了固定RCA可作为酶化学修饰研究的很好的工具。本研究得到的蛋清溶菌酶的酶比活力高达3122.7U/mg,酶比活力的回收率达到80.64%,酶得率达1.789mg/ml。将分离后的Gal-LYZ和LYZ进行光学分析和酶学性质比较,结果显示:吸收光谱和荧光光谱的结果都表明LYZ半乳糖苷化后结构发生了变化。修饰前后酶的最适温度分别为41℃、37℃;最适p H分别为6.2、6.6。Cu²⁺、Mn²⁺、Ba²⁺、Zn²⁺、Na+均对酶修饰前后有激活作用,K+对两者都表现为抑制作用,但对LYZ有激活作用的Mg²⁺对Gal-LYZ表现为轻微的抑制作用,而对Gal-LYZ有激活作用的Ca²⁺、Fe²⁺对LYZ表现为抑制作用。总体上修饰后的Gal-LYZ活性大大降低了,说明半乳糖占据了其分子表面的容纳多糖底物裂隙,使得酶的活性降低。