本论文以环氧基改性的D152阳离子交换树脂为载体通过共价连接的方法固定β-半乳糖苷酶。与传统的共价法固定酶相比较，本法具有固定条件温和、操作工艺简单和酶与载体结合牢固等优点，而且所得固定化酶具有良好的稳定性和重复使用性。文中对β-半乳糖苷酶的固定化条件、固定化酶的性质以及固定化酶水解乳糖的动力学进行了系统研究。1.固定化条件研究研究了（NH₄）₂SO₄浓度、加酶量、pH值、温度和时间对改性D152阳离子交换树脂固定β-半乳糖苷酶的影响，并用红外光谱和扫描电镜表征了固定化β-半乳糖苷酶的结构。结果表明：在（NH₄）₂SO₄浓度1.75mol·L^-1，加酶量1.54U·g^-1，pH6.5，温度35℃和时间4h的条件下，固定化β-半乳糖苷酶比活力和活力回收率分别为0.127U·g^-1和8.25%。2.固定化酶的性质研究（1）动力学：研究了时间、底物浓度、pH值、温度、激活剂与抑制剂对固定化β-半乳糖苷酶催化ONPG水解反应速率的影响。结果表明：固定化β-半乳糖苷酶催化ONPG水解的最适pH值和温度分别为6.5⁷.5和35⁴5℃；K_m为245.652μmol·L^-1；Ca²⁺、Mn²⁺和Fe²⁺在<10^-3mol·L^-1时有激活作用；Mg²⁺在<10^-5mol·L^-1时有激活作用，在>10^-4mol·L^-1时有抑制作用；Zn²⁺在<10^-5mol·L^-1或>10^-4mol·L^-1时起激活作用；Cu2+在<10^-5mol·L^-1或>10^-4mol·L^-1时起抑制作用。（2）稳定性：研究了pH值、温度、时间和操作对固定化β-半乳糖苷酶稳定性的影响。结果表明：固定化酶适宜在pH7.5，且低于20℃的环境中保存；固定化酶在pH7.5，5℃时半衰期为32d，20℃时半衰期为28d；批次操作稳定性较好，连续反应10次后固定化酶活力保持在85%以上。3.固定化酶水解乳糖的动力学研究研究了乳糖浓度、pH值、温度和时间对固定化β-半乳糖苷酶催化乳糖水解反应速率的影响。结果表明：固定化酶催化乳糖水解的最适pH值和温度分别为7.0和35℃，K_m为649.314μmol·L^-1；酶活性降为水解ONPG时的约1/25；乳糖水解率与反应时间之间显著地呈正线性相关。