玉米NPR类基因的克隆及功能初步分析

被引量 : 1次 | 上传用户:coding_key
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为适应复杂的环境并抵抗环境中病原菌的侵害,植物在长期进化的过程中自身形成了多种复杂的防御机制。系统获得性抗性(SAR)就是一种重要防御机制。克隆玉米SAR系统的NPR类关键基因,对培育抗病能力强的玉米新品种具有重要意义。本实验利用玉米全基因组数据库资源和反转录PCR技术,克隆获得了一个玉米NPR类基因,对这个基因的特征及功能进行了分析,获得如下主要结果:1、该基因全长1434bp,编码477个氨基酸,序列登录NCBI网站,结果发现与已登录的玉米NPR1基因(登录号NM001154115)相似性99%,氨基酸相似性100%,因此,我们将获得的基因命名为ZmNPR1,其蛋白质分子量Mw=53.30kD,等电点pI=5.68;2、克隆的ZmNPR1与拟南芥和水稻NPR基因家族成员进行了序列比对分析,结果显示ZmNPR1与水稻OsNPR2具有较高的同源性,包含两个保守结构域POZ/BTB位点和Ankyrin repeat锚蛋白重复位点。3、利用基因枪技术将含有ZmNPR1基因的融合载体导入洋葱表皮细胞,结果显示ZmNPR1主要在细胞核中发挥作用。4、分别用一定浓度水杨酸、茉莉酸甲酯、玉米矮花叶病毒和玉米小斑病原菌处理玉米叶片,利用半定量PCR技术,分析了这四种处理下ZmNPR1基因和玉米防卫基因PAL(苯丙氨酸解氨酶)表达情况,结果显示,水杨酸和两种病原物的处理可以诱导ZmNPR1基因和PAL基因的表达,而茉莉酸甲酯处理下基因的表达受到抑制。5、构建了ZmNPR1过量表达载体和RNAi干涉载体并通过原位转化技术导入玉米中,共获得19株干涉植株,对其中10株进行PCR检测,结果均为阳性。6、对获得的干涉植株体内游离态水杨酸(SA)含量进行测定,结果显示干涉植株水杨酸的含量相比于对照平均下降了51%。上述结果均显示了克隆的ZmNPR1基因与玉米的抗病性相关。SAR是植物抵抗疾病系统的重要组成部分,而NPR类基因是SAR系统中的关键基因,因此,ZmNPR1基因的成功获得,为利用基因工程改造玉米抗病品种提供了一个有价值的目的基因,具有重要的意义。
其他文献
针对"2+2"中法合作办学项目国内教学阶段中呈现出的特殊性和复杂性,探索适应中法合作办学项目法语教学的方法,由比较式教学法入手,通过英语法语比较分析法、中法文化比较导入
目的分析骨母细胞瘤的影像学表现,以期提高对其的认识。方法回顾分析经病理证实的15例骨母细胞瘤的影像学资料。结果15例均接受x线和cT检查,发生于脊椎11例,发生于长骨2例,发生于
家畜摄取养分是为了生存和生产。养分摄入不足时,动物健康受损,生产性能下降。生殖是家畜的一种特殊生产,营养状况与其密切相关。本文着重综述能量、蛋白质、矿物质和维生素等营
市场经济快速发展,传统企业对市场反应迟钝,难以适应快速而又激烈的竞争。项目组织作为一种新型运作模式,能较好地适应市场经济对企业的高要求,被广泛的应用于现代企业中。文
"营改增"是继1994年分税制实施以后,又一次较为深刻的税制变革。在实现制度意图的同时,"营改增"会对中央与地方财政关系提出新的挑战,导致地方政府承受更大的财政压力。但借
无刷直流电机具有调速功能优良、结构简单、能量密度高等特点,被广泛应用在医疗器械、国防、交通以及航天航空等领域。但是无刷直流电机的转矩脉动大,使系统的性能受到极大影
北京大学董学文、张永刚的新著<文学原理>(北京大学出版社2001年1月出版)有这样几种可贵的学理品格:一、以学理定位聚焦"元问题"与"问题元"<文学原理>采用"回到原理"的本体论
周隋时期,府兵军号的滥授及其阶官化过程,削弱了这类军号原有的军事职事功能,却使得府兵制组织系统拥有了重要的品阶政治功能;府兵军号也因此成为周隋官阶体系中本阶官位制度
<正> 校本课程发展(school based curriculum development)与教育行动研究(educational actionresearch),在许多方面都有相似或共通之处。在某些地方,如英国,校本课程发展与
2008年的汶川大地震给中国的应急通信事业带来了巨大的震动。本文就在灾情发生后,如何提供高效稳定的应急通信方案提出了自己的想法,具体分析黄金救援72小时的通信保障的相关需