PDT对釉质微量元素及牙髓细胞因子表达变化的实验研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:guozhi1988
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目的:1.使用通体发光光纤应用于光动力疗法(Photodynamic Therapy,PDT)防龋治疗四次后检测牙釉质钙磷元素含量的变化,为论证光动力疗法促进再矿化提供理论支持。2.观察不同功率的通体发光光纤联合PDT防龋对牙髓组织病理变化的影响。3.经通体发光光纤一次及四次治疗后检测牙髓矿化及疼痛相关因子变化,为进一步论证光动力疗法应用于动物模型上的有效性及安全性提供理论支持。方法:用S.mutans菌液建立大鼠致龋模型。将60只大鼠分为五组,17 mW PDT、34 mW PDT、68 mW PDT作为A、B、C实验组,2%氟化钠溶液(阳性对照组,D组)、0.9%生理盐水(阴性对照组,E组)。650 nm半导体激光器接连通体发光光纤,以40μg/m L的血卟啉单甲醚(Hematoporyrin monomethyl Ether,HMME)为光敏剂对大鼠牙齿避光孵育5 min,不同功率的参数光照90 s,进行实验。使用电感耦合等离子体发射光谱法(Inductively coupled plasma-optical emission spectroscopy,ICP-OES)检测四次治疗后大鼠磨牙中钙磷元素的变化。在治疗四周结束后,分别取大鼠牙髓组织,光学显微镜下观察牙髓组织的病理变化。显微镜下提取34 mW组大鼠一次和四次治疗后的第1、3、7、14天牙髓,研磨,离心,使用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)分别测量大鼠牙髓内降钙素基因相关肽(Calcitonin Gene Related Peptide,CGRP)和P物质(Substance P,SP)的表达变化。结果:1、实验前后各组Ca含量:实验前各组Ca含量不具有统计学差异(P>0.05);实验后B、C组Ca实验后含量明显高于两组各实验前含量,具有统计学差异(均P<0.05);D组Ca实验后含量明显高于实验前含量,具有统计学差异(P<0.05);实验各组Ca(35)值比较:A组Ca(35)值显著低于B、C两组,具有统计学差异(P<0.05);B、C两组Ca(35)值无统计学差异(P>0.05)。B组和C组(35)值明显高于D组Ca(35)值,具有统计学差异(P<0.05);2、实验前后各组P含量:实验前各组P含量不具有统计学差异(P>0.05);实验后B、C组P实验后含量明显高于两组各实验前含量,具有统计学差异(P<0.05);D组实验后P含量低于实验前含量,不具有统计学差异(P>0.05);各组(35)值比较:A组P(35)值均显著低于B、C两组P(35)值,具有统计学差异(P<0.05);B、C两组P(35)值无统计学差异(P>0.05)。B组和C组P(35)值明显高于D组P(35)值,具有统计学差异(P<0.05)。3.组织病理学检测显示:四次HMME-PDT照射后68 mW组牙髓出现毛细血管扩张、充血,但未见炎症细胞的浸润,其余组未见明显炎症细胞浸润,水肿,充血,坏死。4、牙髓细胞因子测定结果:CGRP结果显示:治疗一次的牙髓组织中CGRP表达量在第1、3、7、14天明显高于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。治疗四次后大鼠牙髓CGRP表达量在第1、3、7、14天显著高于对照组具有统计学意义(P<0.05)。P物质结果显示:一次治疗后牙髓组织中P物质表达量在第1、3、7、14天与对照组相比无统计学差异(P>0.05);四次治疗后第1、3、7、14天与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:1、不同功率的HMME-PDT对促进大鼠磨牙微量元素影响的能力不同。本实验通过使用通体发光光纤联合650 nm半导体激光,选用34 mW、68 mW HMMEPDT防龋具有促进大鼠磨牙钙、磷含量增加的作用。2、在本实验四次治疗(每周一次,连续四次)后17 mW、34 mW PDT组未引起牙髓组织明显的病理学变化。68 mW PDT组均会导致牙髓组织病理学变化。以低能量治疗为原则,结合元素含量测量结果,最佳光照功率为34 mW。3、选择34 mW(90s)HMME-PDT照射大鼠磨牙,治疗一次和四次均促进CGRP表达量增加,可能启动了牙髓内源性再矿化相关因子。治疗一次和四次后P物质表达量未见明显变化,本实验参数范围内,PDT促进再矿化未引起牙髓疼痛。
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