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结冷胶是一种通过发酵生产得到的微生物胞外多糖,由于其高效、无毒、耐高温等特点被广泛用于食品、医药、化工等行业。目前,我国结冷胶的产率不高,其生产和应用今后还会有很大的发展前景,所以成为很多研究人员的研究方向。结冷胶的常用生产菌种是一种好氧的革兰氏阴性杆菌,它可以把葡萄糖、麦芽糖、淀粉等作为碳源,牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉等作为氮源,然后加入其他无机盐进行发酵生产。研究共分为三个部分,内容如下:研究通过单因素实验,以发酵所得结冷胶的粘度和产胶率为指标,对发酵时间、接种时间、装液量、接种量、温度、pH、摇床转速等条件进行优化,然后通过正交试验确定发酵时间为60h,接种时间为20h,装液量为10%,接种量为10%,温度为30℃,pH为7.2,摇床转速为220rpm时产胶率最高。实验以葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、乳糖分别作为菌种的碳源,其他成分不变进行摇瓶实验,实验显示蔗糖是最好的碳源,然后通过单因素实验确定最佳用量;以牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、豆饼粉、硝酸胺分别为氮源,其他成分不变,得出最佳氮源为豆饼粉,然后通过单因素实验确定最佳用量;以硫酸镁、磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钾、氯化锰和硫酸亚铁分别为无机盐,其他成分不变,得出添加硫酸镁和磷酸二氢钾的产量都很高,再通过单因素实验得出最佳用量;最后通过正交试验确定培养基最佳成分:蔗糖为3%,豆饼粉为0.6%,硫酸镁为0.06%,磷酸二氢钾为0.14%。实验通过对补碳实验的研究发现初始碳源控制在3%,在16h时补加碳量为1.5%时发酵液的粘度和产胶率都最高;实验通过对二次发酵pH的研究发现每过4h加碱调节pH为7.0时发酵的效果最好;最后实验选择补碳量,补碳时间和固定pH值为3个因素,选择合适的水平进行正交试验,得出二次发酵的最佳条件为:补碳量为1.5%,补碳时间为16h,固定pH值为7.0。采用最佳二次发酵条件进行摇瓶发酵,60h后测得发酵液的粘度和产胶率分别为45600cp和1.62%,较之一次发酵产胶率增加了15.7%。