Nlrp基因家族的表达及Nlrp2和Nlrp4g在小鼠早期胚胎发育过程中的功能

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:happykaijie1990
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Nlrp基因家族在小鼠和灵长类的先天免疫系统和生殖系统起着很关键的作用。到目前为止,在小鼠上鉴定出20个Nlrp基因家族的成员。近来利用系统进化分析法在小鼠上鉴别了Nlrp基因家族中与免疫有关的分支,包括7个Nlrp基因,它们分别是Nlrp1a、1b、1c、3、6、10和12。起初对这个基因家族的研究主要集中在凋亡和炎症信号通路上,近年来越来越多的研究表明一些Nlrp基因在小鼠生殖系统中发挥着至关重要的作用。例如, Nlrp5和Nlrp14已经被研究且结果表明母源性敲除/沉默这两个基因都将导致小鼠早期胚胎发育阻滞。因此,我们选择并研究除了Nlrp5和Nlrp14以外的其它Nlrp基因在小鼠上的表达,并深入研究了Nlrp2和Nlrp4g在小鼠早期胚胎发育过程中的功能。1、Nlrp基因家族中免疫相关基因在小鼠上的表达。结果表明: Nlrp1a、Nlrp1b、Nlrp1c、Nlrp3、Nlrp6和Nlrp12在小鼠附植前胚胎中都不表达,而Nlrp10在桑椹胚和囊胚中能检测到微弱的表达。这7个Nlrp基因家族中免疫相关基因都在多种组织中表达,这些基因有一个共同的特点就是都在脾脏和肝脏中表达。Nlrp基因家族中免疫相关基因在小鼠细胞中的表达也各不相同,但有一个共同的特点就是都不在卵母细胞中表达。2、Nlrp4a-Nlrp4f在小鼠发育过程中的表达分析。结果表明:在附植前的发育过程中Nlrp4a、Nlrp4b、Nlrp4d和Nlrp4f有类似的表达谱,它们在GV期卵母细胞和成熟卵母细胞中大量表达,随着合子基因组的激活,这些基因的表达急剧下调并消失。Nlrp4c和Nlrp4e的转录物也是在GV期卵母细胞和成熟卵母细胞中大量表达,受精之后表达下降,但在桑椹胚和囊胚中又重新检测到它们的表达。在组织中的研究表明Nlrp4b和Nlrp4c只在卵巢中表达,而Nlrp4a、Nlrp4d和Nlrp4f不仅在小鼠卵巢中表达,还在睾丸组织中表达,而Nlrp4e的转录物则在多种组织中都能检测到。这些基因都在小鼠卵巢中表达且都随着小鼠年龄的增加而表达下调。在小鼠不同细胞中的表达表明Nlrp4d的转录物不仅在卵母细胞中检测到,在卵丘细胞和精子中也能检测到,而其它的Nlrp4基因都有相同的表达谱,它们都只在卵母细胞中表达。3、Nlrp9a-Nlrp9c在小鼠发育过程中的时空表达。结果表明:小鼠早期胚胎中Nlrp9a、Nlrp9b和Nlrp9c的转录物都是母源性的,合子基因组激活以后完全降解。Nlrp9a在小鼠出生后的第5d开始表达,Nlrp9b和Nlrp9c在E7.5能检测到微弱的表达。Nlrp9a只在卵巢组织中能检测到,Nlrp9b除了在卵巢中表达,还在小肠中能检测到,Nlrp9c在多种组织中表达。Nlrp9a-Nlrp9c在小鼠卵巢中的表达随着小鼠年龄的增加而下降。Nlrp9a和Nlrp9c只在小鼠卵母细胞中表达, Nlrp9b的转录物除了在卵母细胞中能够检测到,在D3ES和F9ES中也能检测到微弱的表达。4、小鼠早期胚胎的发育需要Nlrp2基因的参与。结果表明:在卵泡发生的过程中,Nlrp2mRNA和蛋白都在卵母细胞和颗粒细胞中表达。排卵和受精以后,Nlrp2mRNA伴随着合子基因组的激活而显著下调,在2-细胞期以后的胚胎中检测不到,但NLRP2蛋白的表达却持续到囊胚期。共聚焦显微镜的结果表明NLRP2主要在胞质中定位,免疫电镜分析进一步揭示出NLRP2不仅在胞质中定位,还在细胞核以及核孔附近存在。通过RNA干扰方法在GV期卵母细胞中特异性的沉默Nlrp2,结果表明这些Nlrp2沉默的GV期卵母细胞能够通过MI中期并排出第一极体,但这些成熟的卵母细胞经过孤雌激活后,孤雌胚胎主要阻滞在2-细胞期。进一步的研究显示在合子中母源性的沉默Nlrp2也导致早期胚胎发育阻滞。此外,在合子中过表达Nlrp2,合子能够发育成形态正常的囊胚,但在这些囊胚中增加了细胞凋亡。5、母源性沉默Nlrp4g阻滞早期胚胎发育。结果表明:Nlrp4g转录物和蛋白在小鼠卵巢中特异性表达,这种表达限制在不同发育阶段的卵泡卵母细胞中,且Nlrp4g转录物和蛋白的表达随着小鼠年龄的增加而显著下降。无论是在正常受精的胚胎还是在孤雌胚胎中,Nlrp4g转录物都伴随着合子基因组的激活而显著下调,但NLRP4G蛋白的表达却持续到囊胚期。共聚焦显微镜分析表明NLRP4G定位在不同时期胚胎的胞质中,而免疫电镜进一步证实这个蛋白存在于胞质溶胶,并不在胞质细胞器中定位。通过RNA干扰方法在GV期卵母细胞中特异性沉默Nlrp4g并不影响卵母细胞成熟,但是在合子中母源性的沉默Nlrp4g则导致早期胚胎主要阻滞在2-细胞期和8-细胞期之间。这些结果证明了Nlrp4g是一个卵母细胞特异性基因,在早期胚胎发育过程中需要Nlrp4g的参与。
其他文献
本文通过对比国内外茶产业的发展模式,分析我国茶产业从源头到市场各环节的特点,并提出今后努力的方向。在知识产权体系中,地理标志最具有"亲农性",地理标志产品是集天、地、
文章主要介绍了建筑质量工程检测的主要内容,分析了目前我国建筑质量工程检测中存在的问题,提出了几点加强建筑质量工程检测的有效措施,以此促进我国工程检测的规范,最终提升
研究性学习可以激发小学生的学习兴趣,丰富他们的生活和学习体验,有助于他们养成勤于思考的习- 惯和尊重事实的科学态度,促使他们形成初步的合作意识,有利于他们智能的开发;
<正>我国2006年出台的国际趋同的《企业会计准则》中,采用了目前国际上较为通用的减值测试法对合并商誉进行后续计量,将企业合并中购买方的合并成本大于合并中取得的被购买方
物流业的国际化趋势和迅猛发展要求物流从业人员既要精通业务也要有一定的外语交际能力。提高高职物流专业学生的英语应用能力,适应其职业岗位要求,成为高职物流英语教学的目
双子表面活性剂有非常低的CMC值和很高的界面活性。在生物医药与生物分离、纺织和皮革助剂以及农用化学品和化妆品等领域有良好的应用前景。文章以乙二醇和三氯氧磷为原料,经
近年来,公司之间并购重组活跃,合并产生的商誉是否如期为购买方在生产经营过程中带来超额利润,商誉的核算是否真实反映其所带来的效益和价值成为上市公司监管中关注的重点。
目的通过小干扰RNA沉默检测DDX39基因对肾透明细胞癌增殖的影响及其相关机制。方法应用脂质体转染法将DDX39-siRNA转染人肾透明细胞癌786-O细胞,试验设空白对照组、阴性对照
当前我国采取行政主导的流域区际水资源配置机制,忽略了流域区际生态保护贡献的差异,忽视了流域水资源生态资产价值,造成流域水资源调出区生态利益损失。因此,亟须建立跨流域
“做你所说的 ,说你所做的”是国际评估界的一句名言 ,其含义是指注册资产评估师在认真而严肃的完成每一评估项目时 ,应充分地履行工作计划的每一步骤 ,如实地表达所做的工作