【摘 要】
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前言 干细胞是指具有无限或较长期的自我更新能力,并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞。按照组织发生学来源,可将干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。近年来对成体干细
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前言 干细胞是指具有无限或较长期的自我更新能力,并能产生至少一种高度分化子代细胞的细胞。按照组织发生学来源,可将干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。近年来对成体干细胞的研究越来越受到重视,目前已发现的成体干细胞有造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌干细胞、角膜干细胞、胰腺干细胞、皮肤干细胞、肝脏干细胞等,并已不同程度地用于临床治疗。但迄今为止国际上对气管干细胞的研究还很不完善。先前本研究组已成功地在体内外建立了氟脲嘧啶介导的大鼠气管损伤修复模型,并对气管干细胞进行了初步的定位和性状解析。 干细胞具有排出荧光染料Hoechst33342的特性。近年来的研究表明,干细胞的这一特性(即SP表型)与ATP结合盒(ABC)转运蛋白超家族成员之一的ABCG2(又名乳癌耐药蛋白1,Bcrp1)的表达有关。现已证明在多个物种的多种组织来源的SP细胞中检测到ABCG2的高表达,如骨髓、肝、肌组织、乳腺上皮及ES细胞。ABCG2与SP表型的密切关系,使得ABCG2成为多潜能干细胞的共同标志,对干细胞的鉴定具有重要意义。为更深入地了解气管干细胞的特性,本研究在5-FU介导的气管上皮损伤修复模型的基础上,应用间接免疫荧光法和Wetern blot动态观测了修复过程中各时间点气管上皮ABCG2蛋白的表达,借以原位观察了气管干细胞在整个修复过程中的动态分布。 近年来的研究表明Wnt信号及其成员对胚胎及成体的原始细胞的增殖和分化具有重要的调节作用。为探讨气管干细胞的增殖分化与Wnt/β-catenin信号途径的关系,阐明干细胞增殖分化的分子机制,本研究应用RT-PCR及间接免疫荧光的方法动态观测了修复过程中Wnt信号相关成分Wnt1、β-catenin、cyclinD1 mRNA的变化以及β-catenin蛋白的细胞内分布,初步探讨了Wnt/β-catenin信号途径参与调控气管干细胞增殖
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