目的:尿道缺损和尿道狭窄是泌尿外科的常见多发病,当尿道缺损和尿道狭窄较长时,难以用自体组织进行尿道修复。而组织工程的发展为解决这一难题提供了新的方向。本试验探索了膀胱平滑肌细胞的体外培养方法,并评价生物可降解材料聚羟基丁酯(PHB)与兔膀胱平滑肌细胞的生物相容性,探索PHB作为支架材料构建组织工程尿道的可行性。 方法:1.无菌条件下取出新西兰白兔膀胱,分别采用组织块法、酶消化法体外培养膀胱平滑肌细胞,观察记录两种方法下的细胞生长曲线以及细胞贴壁率,对传代细胞做HE染色及抗α-肌动蛋白免疫组化鉴定。2.将膀胱平滑肌细胞与PHB共同培养,利用相差显微镜观察细胞的粘附和生长情况,利用MTT法检测细胞的粘附与增殖,并利用扫描电镜检测细胞在材料上的空间生长情况。 结果:1.组织块法、酶消化法体外培养膀胱平滑肌细胞均获得成功,传代细胞抗α-肌动蛋白免疫组化鉴定为阳性。2.膀胱平滑肌细胞在PHB上粘附良好,粘附率为83.6%,PHB对细胞的生长和增殖无影响。 结论:1.组织块法和酶消化法均适用于膀胱平滑肌细胞的体外培养,酶消化法原代至传代培养所需时间短,而组织块法原代至传代培养所需时间相对较长,但原代培养方法简便。2.兔膀胱平滑肌细胞与PHB细胞相容性好,PHB作为构建泌尿系组织的支架材料具有可行性。