金枪鱼下脚料制备高F值寡肽的工艺及活性研究

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金枪鱼是一种营养价值和食用价值都非常高的深海鱼类。但金枪鱼在加工过程中会产生大量碎肉,可占原料鱼的11%,然而碎肉大多作为鱼粉原料进行低值利用。然金枪鱼碎肉同金枪鱼一样营养丰富,目前尚无有效的高值化开发利用技术。高F值寡肽是一个混合寡肽体系,由2~9个氨基酸残基组成。F值为支链氨基酸与芳香族氨基酸含量的摩尔数之比,比值大于20称之为高F值寡肽。研究表明,高F值寡肽产品具有很好的生理功能,例如:醒酒、护肝、治疗肝性脑病、改善蛋白质营养状况等。本文主要研究内容:采用金枪鱼碎肉为原料,通过双酶分步水解法制备高F值寡肽。通过Box-Behnken设计,确定最佳酶解条件,酶解液经活性炭静态吸附去除芳香族氨基酸,采用SephadexG-25葡聚糖凝胶层析测定高F值寡肽的分子量分布。结果表明:第一步水解用酶选用胃蛋白酶,最优酶解工艺条件为酶用量650U/g,料水比1:7(g/mL),温度35.9℃;第二步水解用酶选用风味酶,最优酶解工艺条件为酶用量50700U/g,pH6.51,温度51℃。酶解液吸附脱芳的最优条件为pH3.0,活性炭用量1:20(g/mL),温度35℃,时间3h。脱芳后的酶解液经层析得到两个高F值寡肽组分,分子量分布在600-1300Da,F值分别为37.52、32.08。采用不同浓度的高F值寡肽液灌胃小鼠,研究高F值寡肽液对小鼠抗醉酒、醒酒及抗疲劳作用。结果表明,高F值寡肽液能明显缩短实验组小鼠醒酒时间,延长小鼠翻正反射消失时间,减少运动后小鼠肝糖原的消耗,降低血尿素氮含量和血乳酸含量。两个寡肽组分经C18反向高效液相分离和序列测定,得到5个高F值寡肽,其中1个7肽,3个6肽,1个5肽。
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