初诊急性白血病患者白血病细胞膜TF表达和血浆F1+2的检测及临床意义

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前言和目的急性白血病(AL)容易发生凝血异常。促凝活性(PCA)增高是AL凝血异常的最重要致病机制。目前认为白血病细胞表达至少两种已知的肿瘤相关促凝物质:组织因子(TF)和癌性促凝物(CP),其中以TF最为重要。由于只有当TF并入或锚定在膜磷脂时才能发挥最大的促凝活性,白血病细胞膜不仅可能表达TF较高,同时也能提供凝血级联发生的膜磷脂表面,故AL容易发生凝血异常。目前多用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血浆或细胞裂解液TF水平和实时定量PCR(RQ-PCR)检测TF-mRNA等来探索AL凝血异常机制,而关于用流式细胞术(FCM)测定白血病细胞膜表面TF表达程度与凝血异常关系研究的相关资料较少。我们通过观察各亚型初诊AL患者白血病细胞膜表面TF的表达程度和反映凝血激活标志物之一凝血酶原片段1+2(F1+2)的血浆水平,对AL并发弥散性血管内凝血(DIC)组和无DIC组的胞膜TF表达程度和血浆F1+2水平进行比较,并观察它们之间相互关系,探讨上述指标对AL并发DIC的预测和诊断评价意义,以此辅助判断AL患者并发凝血异常的潜在性和可能的严重程度,并为TF在AL促凝活性增高机制中的作用进一步提供支持性依据。方法对50例初诊AL患者和12例“正常”对照骨髓分离的单个核细胞(MNCs)用FCM圈定白血病细胞群并检测其胞膜TF的表达程度;ELISA双抗体夹心法检测50例AL患者和32例正常对照血浆F1+2浓度。又将AL分为合并DIC组17例和无DIC组33例,比较两亚组白血病细胞膜TF表达程度和血浆F1+2水平,用直线相关分析显示白血病细胞膜TF表达程度与血浆F1+2含量间的相关性。结果1、急性髓系白血病(AML)-M3白血病细胞膜TF的表达(平均48.23%)高于AML-M1-2、M4和ALL(分别p<0.01,<0.05和<0.01),与AML-M5(平均40.51%)无显著性差异(p>0.05)。设TF表达细胞占被检异常细胞群≥20%为阳性,则TF抗原阳性率也以AML-M3最高(100%),其次AML-M5和M4(分别75%和66.7%)。正常对照组均未见粒、单细胞群表达TF。2、AML-M3、M4和M5血浆F1+2水平均显著高于正常对照组水平0.72±0.35nmol/L(p<0.05),且较AML-M1-2和ALL均有显著性差异(p<0.05)。合并DIC组的白血病细胞膜TF表达和血浆F1+2水平均高于无DIC组,有极显著意义(分别p<0.005和p<0.001)。3、TF表达程度和血浆F1+2水平呈一定相关性(r=0.682,p<0.001)。结论初诊AL患者存在凝血激活,表现为白血病细胞膜TF表达增多,凝血酶生成增加,尤以AML-M3和M5为著;FCM测定白血病细胞膜TF的表达程度和(或)ELISA测定血浆F1+2水平可作为AL并发DIC的辅助判断指标;胞膜TF表达程度对AL凝血异常发生的潜在性可起一定预测和提示作用。
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