论文部分内容阅读
目的研究Notch亻信号通路介导人胃癌细胞株BGC-823凋亡可能的机制,探讨BGC-823细胞具体的凋亡途径。方法以不同浓度的γ-分泌酶抑制剂DAPT处理人胃癌细胞株BGC-823不同时间后,二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞的凋亡率,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法分别检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8(caspase8)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(caspase9)的mRNA和蛋白表达水平和Notch1的蛋白表达量水平。结果在DAPT干预下,流式细胞仪检测到的人胃癌细胞株BGC-823的早期细胞凋亡率随DAPT浓度的升高和作用时间的延长增加,除1μmol/L组差别无显著性(P>0.05)外,其余各组差别均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),呈时间剂量依赖性。Notch1的蛋白表达量随DAPT浓度的升高和作用时间的延长降低,在DAPT浓度大于1μmol/L时较对照组有显著性差异。Caspase8各组的mRNA和蛋白表达量差异较对照组均无统计学意义(P>0.05)。Caspase9的mRNA和蛋白表达量随DAPT浓度的升高和作用时间的延长增加,mRNA的表达量在DAPT浓度大于1μmol/L时较对照组有显著性差异(P<0.05,P<0.01),蛋白表达量在1μmol/L DAPT处理48h及5μmol/L DAPT处理24h组差异无统计学意义(P>0.05),其余各组均有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论1、Notch信号通路介导了人胃癌细胞株BGC-823的凋亡。2、Notch1表达的下调能够促进人胃癌细胞株BGC-823的凋亡。3、Notch信号通路可能通过线粒体途径调控人胃癌细胞株BGC-823的凋亡,可能未通过死亡受体途径。