【摘 要】
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发展高效的完整蛋白质分离分析技术至关重要。近年来,毛细管液相色谱技术受到广泛关注,然而其分离效率和分离选择性仍有待提高。本论文主要工作在于研制新型的毛细管整体液相
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发展高效的完整蛋白质分离分析技术至关重要。近年来,毛细管液相色谱技术受到广泛关注,然而其分离效率和分离选择性仍有待提高。本论文主要工作在于研制新型的毛细管整体液相色谱固定相,以期改善完整蛋白质的分离分析性能。全文共分为三章。第一章:简述了蛋白质的主要分离技术及主要的蛋白质色谱分离技术。第二章:通过“一锅法”制备了离子液体嵌合高交联有机聚合物整体柱poly(DPEPA-AVI),并结合傅里叶变换红外光谱仪、扫描电子显微镜对该有机整体材料进行表征分析。有机聚合物整体柱poly(DPEPA-AVI)具有典型的反相色谱保留机制。采用烷基苯、多环芳烃、芳香胺类物质及标准蛋白质样品考察了poly(DPEPA-AVI)整体柱的分离性能,结果显示该整体柱具有良好的分离潜能,有望用于蛋白质的分离分析。第三章:采用“一锅法”首次制备了二季戊四醇戊-/己-丙烯酸高交联杂化毛细管整体柱(DPEPA-POSS)并采用傅里叶变换红外光谱仪、热重量分析仪、扫描电子显微镜、氮气吸附/解吸附分析仪进行表征。DPEPA-POSS杂化毛细管整体柱具有典型的反相色谱保留机制。酰胺类、硫脲类以及苯酚类位置异构体分离结果显示DPEPA-POSS杂化毛细管整体柱具有极高的柱效和优异的分离选择性。进一步将DPEPA-POSS杂化毛细管整体柱应用于标准蛋白质混合物、卵清蛋白质和BARD1 BRCT域蛋白的分离分析,其分离效率优于商品化C8色谱柱的分离效果,并展示了良好的选择性,有望在完整蛋白质的分离分析领域发挥重要的作用。
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