扇叶铁线蕨成分提取分离及其生物活性分析

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扇叶铁线蕨(Adiantum flabellulatum L.)是一种民间中草药,在传统中医中,内服用于治疗感冒发热、各类炎症、泌尿系统结石等,外用治疗烧烫伤、蛇咬伤等。扇叶铁线蕨叶片及根状茎均含有多种挥发油,全草甲醇萃取物具有止痛作用。但是扇叶铁线蕨中有效成分尚未完全明确,本论文对扇叶铁线蕨展开了化学成分提取分离及生物活性的研究,主要结果如下:1、广东广西两地扇叶铁线蕨乙醇提取物黄酮与酚酸含量分析和抗氧化活性研究:采用80%乙醇加热提取,测定提取率;以芦丁、没食子酸为标准品,用分光光度法测定了扇叶铁线蕨不同部位的黄酮和酚酸含量;利用分光光度法测定扇叶铁线蕨不同部位对DPPH、ABTS~+自由基的清除能力及还原能力。结果显示,广西地上部分提取率最大为16.4%;不同产地扇叶铁线蕨不同部位黄酮和酚酸含量有一定差异,广西地上含量较多,总黄酮含量为25.53 mg/g,酚酸含量为39.25mg/g;两地的扇叶铁线蕨地下部分对DPPH、ABTS~+自由基清除能力及还原能力均大于地上部分。2、扇叶铁线蕨不同提取物生物活性及化学成分分析:分别利用纯正己烷(HF),乙酸乙酯/二氯甲烷(v/v=2:1)(EF)两种溶剂对广西产扇叶铁线蕨全草进行浸泡提取。抗氧化活性研究表明:EF部分提取物对DPPH、ABTS~+自由基清除能力及还原能力均大于HF部分。抗菌活性研究表明:HF和EF部分提取物对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均有抑制作用,且EF对金黄色葡萄球菌更加敏感,最小抑菌浓度(MIC)小于0.875mg/mL。抗肿瘤细胞活性研究表明:高浓度(360μg/mL)HF和EF部分提取物均对MCF-7(人乳腺癌细胞)具有抑制作用,且72h培养后抑制效果明显。运用HPLC-MS的方法对不同提取物进行化学成分分析,结果表明HF和EF部分提取物均含有大量次级代谢产物,包括黄酮类、酚酸类、脂肪酸等52个化合物。3、扇叶铁线蕨化学成分分离与结构鉴定:运用硅胶柱分段、MCI树脂去除色素、MPFC分离、TLC分离及初步检测、重结晶提纯等方法对扇叶铁线蕨HF和EF部分提取物进行分离,用核磁氢谱、碳谱、二维谱、质谱等方法鉴定出9个化合物的结构,其中6个为扇叶铁线蕨首次分离,包括:D-α-托可醌、豆甾-4-烯-6β-醇-3-酮、β-谷甾醇、4,4-二甲基-1,7-庚二酸、原儿茶醛、isoadiantol B。另3个为新化合物,分别暂命名为flabellulatum 1、flabellulatum 2、flabellulatum3,初步研究表明它们属于脂肪酸类和三萜类化合物,其结构和活性正在鉴定和研究中。本文对明确扇叶铁线蕨有效成分,阐明其药用价值及对其进一步开发利用有一定的指导意义。
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