转运蛋白表达变化对急性肝衰竭Beagle犬Gd-EOB-DTPA增强磁共振成像的影响

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背景急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)是一种与多器官功能障碍相关的高死亡率的疾病。由于ALF患者的病情进展快且较为复杂,并易受多种因素的影响,因此正确评估肝脏储备功能可指导临床医师对肝脏疾病患者采取最优化的治疗方案,提高患者生存率及生活质量。应用钆酸二钠(gadolinium?ethoxybenzyl?diethylenetriam-ine pentaacetic acid,Gd?EOB?DTPA)增强磁共振(magnetic resonance,MR)评估肝脏储备功能成为近年来研究热点。肝细胞特异性对比剂Gd?EOB?DTPA经静脉注射后由有机阴离子转运体多肽1(organicaniontransporting polypep tide 1,OAT P1)摄取,继而由胆管侧多药耐药相关蛋白2(multidrugresistance-associated protein2,MRP 2)介导其向胆道排泄。已有大量研究证明OATP1和MRP2在肝脏表达情况的不同导致了各种肝脏疾病特异性的MR成像特点。我们前期的研究也表明,比格犬急性肝衰竭模型Gd-EOB-DTPA增强MR图像中的信号强度有区域性的差异,并可能与肝脏组织区域性坏死的程度有关,但是这种差异是否与OATP1和M RP2在肝脏表达情况有关值得我们去进一步探究。因此本研究旨在探究转运蛋白表达变化对急性肝功能衰竭Beagle犬Gd-EOB-DTPA增强磁共振成像的影响。方法16条成年雄性比格犬随机分成对照组(n=8)和急性肝衰竭组(n=8)。急性肝衰竭组采用四氯化碳联合乙酰氨基酚建立急性肝衰竭模型。造模24小时后进行Gd-EOB-DTPA增强MRI扫描,根据肝细胞期(注射Gd-EOB-DTPA 20分钟时)的MRI图像选择高、中、低信号区域进行肝穿刺。对照组采用同样方法注射等剂量生理盐水后行Gd-EOB-DTPA增强MR扫描,采用同样方法在相应区域进行肝穿刺。对获得MR图像中的信号强度进行测量并分析。将穿刺取得的肝组织分别用于苏木精-伊红(HE)染色法观察病理改变并进行HAI评分,通过Western blot检测Gd-EOB-DTPA的摄取蛋白OATP1及排泄蛋白MRP2的表达情况。采用Pearson相关性分析评估信号强度、HAI、与OATP1、MRP2表达水平之间的相关性。结果急性肝衰竭组Gd-EOB-DTPA增强MR肝内信号强度存在区域性差异,且MR信号强度与肝脏病理HAI评分呈负相关(r=-0.908,P<0.05)。急性肝衰竭组不同MR信号区域的肝组织中,对比剂摄取蛋白OATP1及对比剂排泄蛋白MRP2的表达存在差异。Beagle犬急性肝衰竭模型肝内OATP1的表达水平与HAI评分呈负相关(r=-0.615,P<0.05),MRP2的表达水平与HAI评分呈正相关(r=0.580,P<0.05)。急性肝衰竭组高、中、低信号区OATP1蛋白表达水平与增强后MR信号强度呈正相关(r=0.692,P<0.05),MRP2蛋白表达水平与增强后MR信号强度呈负相关(r=-0.514,P<0.05)。结论Beagle犬急性肝衰竭模型肝内不同损伤区域中OATP1和MRP2表达水平的改变影响了Gd-EOB-DTPA在肝内的分布,从而导致了肝内MR增强信号的差异,这为节段性评估肝细胞功能提供了一定依据。
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