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目的探讨耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布状况、耐药情况、表型特点及耐药基因的流行特点,指导临床医师合理使用抗菌药物,有效地控制多重耐药菌的产生和传播。方法采用WHONET5.6软件统计本院近三年来所有耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,利用最低抑菌浓度(MIC)法检测药敏结果;对初筛阳性菌株,通过改良Hodge试验和EDTA协同试验来初步检测碳青霉烯酶的表型;通过PCR扩增技术和DNA测序来确定碳青霉烯酶和多粘菌素耐药基因的类型。结果本院2014年1月-2016年12月分离CRE菌株共70株,标本类型以胆汁29%(20/70)和痰标本23%(16/70)为主。临床科室主要集中在肝胆外科,占29%(20/70),其次是PICU和重症监护,分别占11.5%(8/70)和10%(7/70)。在年龄分布中,≥60岁组最高占42.9%(30/70),其次是45≤~<60岁组,占25.7%(18/70)。菌株类型以阴沟肠杆菌(28/70)为主,其次是肺炎克雷伯杆菌(23/70)。对青霉素类及头孢类抗菌药物的耐药率均达到90%以上,对多粘菌素B的耐药率最低,仅为5.7%(4/70)。改良Hodge试验和EDTA协同试验阳性率分别为77.1%和87.1%。NDM-1耐药基因阳性率高达75.7%(53/70),其余耐药基因KPC-2、IMP-4阳性率分别为17.1%(12/70)和11.4%(8/70),未检出GES-4、VIM-2、OXA-48耐药基因以及MCR-1、MCR-2多粘菌素耐药基因。其中,有1株同时携带bla NDM-1和bla IMP-4基因;有1株同时携带bla KPC-2及bla IMP-4基因;还有1株同时携带bla NDM-1和bla KPC-2基因。结论本院CRE的检出率逐年增高,菌株类型主要以阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌为主;感染年龄多集中在中老年人群;标本类型以胆汁和痰标本为主;科室分布主要集中在肝胆外科、PICU和重症监护;对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南的耐药率达到100%,除了对氨基糖胺类抗菌药物以及多粘菌素的耐药率较低外,对其它临床常用抗菌药物均表现出了较高的耐药性,尤其是对青霉素类及头孢类抗菌药物;基因型以bla NDM-1基因为主,其次是bla KPC-2基因,bla IMP-4基因相对较少,未发现bla MCR-1和bla MCR-2基因。因此,医院应重视并加强细菌耐药监测,防止耐药菌株感染的暴发性流行。