复发性流产妇女自身抗体阳性血清对BeWo细胞增殖与凋亡的影响

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目的:研究复发性流产妇女自身抗体阳性血清对BeWo凋亡和增殖能力的影响,以及肝素对该细胞生长的调节。方法:1.BeWo细胞培养:BeWo细胞分为四组进行培养:10%自身抗体阳性RSA患者血清、10%自身抗体阳性RSA患者血清+肝素、10%健康妇女血清、10%健康妇女血清+肝素;在37℃,5%CO2孵育箱中培养24小时。2.评价细胞发育能力的指标:凋亡能力的检测:流式细胞术检测凋亡相关蛋白bcl-2;增殖能力的检测:MTT细胞增殖实验检测490nm OD值和细胞免疫荧光检测增殖细胞核抗原(PCNA)。组间比较采用t检验,由SPSS 13.0统计软件完成。结果:1.BeWo细胞增殖能力检测1.1 MTT细胞增殖实验检测平均吸光度值(OD)值自身抗体阳性复发性流产组490nm OD值为0.0321±0.0058,对照组为0.0546±0.0056,比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01)。自身抗体阳性复发性流产组加入肝素后OD值为0.0478±0.0030,与未加肝素前比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01);正常对照组加入肝素后为0.0544±0.0068,与未加肝素比较无显著差异,不具有统计学意义(p>0.01)。1.2细胞免疫荧光检测PCNA平均荧光灰度值(%)自身抗体阳性复发性流产组和对照组平均荧光灰度值(%)分别为18.14±1.62和25.91±0.88,比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01);加入肝素后自身抗体阳性复发性流产组平均荧光灰度值(%)为25.39±1.31,与未加肝素前比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01);正常对照组加肝素与未加肝素比较无显著差异,不具有统计学意义(p>0.01)。2.BeWo细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的检测流式细胞术检测Bcl-2的表达,自身抗体阳性复发性流产组和对照组分别为25.57±1.49和33.81±1.55,两者比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01);加入肝素后,自身抗体阳性复发性流产Bcl-2的表达为32.81±1.44,与未加肝素前比较有显著差异,具有统计学意义(p<0.01);正常对照组加肝素与未加肝素比较无显著差异,不具有统计学意义(p>0.01)。结论:体外实验表明,自身抗体阳性复发性流产患者血清通过促进细胞的凋亡、抑制细胞增殖而影响BeWo细胞发育能力,对滋养层细胞的生物学行为产生直接的影响而导致复发性流产,而肝素能逆转这一作用,有利于提高自身抗体阳性复发性流产患者的妊娠成功率。
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