目的:慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD）是一种高患病率、给社会带来沉重经济负担、严重威胁人类健康的慢性炎症性肺病。气道慢性炎症是慢阻肺的主要发病机制。其中,香烟烟雾等环境污染物刺激诱导的中性粒细胞浸润及基质金属蛋白酶9（Matrix Metalloproteinase-9,MMP-9）的释放,可导致气道重塑和肺实质损伤。伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白（Reversion inducing cysteine rich protein with kazal motifs,RECK）是一种新的MMPs抑制剂,但它在COPD中的作用尚未研究,本研究探讨RECK在COPD患者中的表达及对中性粒细胞功能影响,为COPD的防治提供新的科学依据。方法:募集AECOPD患者和健康对照各50例。通过免疫组化方法检测RECK蛋白在肺组织表达和定位,采用ELISA检测血浆和痰上清液中RECK蛋白表达及血浆炎症因子IL-6、IL-8的表达,采用Pearson相关分析血浆RECK蛋白水平与肺功能（FEV1%predicted）及炎症指标（IL-6和IL-8）的相关性。在体外,利用香烟烟雾提取物（Cigarette Smoke Extract,CSE）刺激人支气管上皮细胞株BEAS-2B,RT-PCR检测细胞RECK、IL-6和IL-8 m RNA表达水平,ELISA检测细胞上清中RECK含量。Ficoll-Hypaque法分离人外周血中性粒细胞,CSE联合rh RECK（人重组RECK蛋白）刺激细胞后,流式细胞术、Transwell实验分别检测中性粒细胞的凋亡和迁移;RT-PCR检测细胞IL-6、IL-8和MMP-9 m RNA表达,细胞培养上清液IL-6、IL-8表达采用ELISA检测,细胞MMP-9蛋白表达采用western blotting检测。结果:1.RECK在人肺组织中的表达和定位:RECK主要表达于气道上皮;与健康对照组相比,COPD患者气道RECK的表达显著降低。2.RECK在COPD患者血浆和痰上清液的表达及其与肺功能和炎症因子的相关性:COPD患者痰上清中RECK含量显著低于健康对照组（0.66±0.59 vs 3.36±3.03ng/ml,P<0.001）,血浆中RECK浓度也显著低于健康对照组（1.18±0.59 vs.1.66±0.79ng/ml,P<0.001）。COPD患者血浆中RECK水平与肺功能FEV1%pred呈正相关（r=0.458,P<0.001）,而与血浆IL-6、IL-8水平呈负相关（r=-0.386、-0.437,P<0.01）。3.CSE刺激对BEAS-2B细胞RECK、IL-6、IL-8表达的影响:CSE刺激后细胞IL-6、IL-8 m RNA表达较对照组明显增加（P<0.01、0.001）;而RECK m RNA和蛋白表达均低于对照组（P<0.05、0.001）。4.rh RECK对CSE诱导的中性粒细胞凋亡、迁移及炎症的影响:与对照组相比,“CSE组”的中性粒细胞凋亡率增加（P<0.05）,而rh RECK预刺激后,与“CSE组”比较,中性粒细胞的凋亡率无明显差异。“CSE组”中性粒细胞的迁移数显著高于对照组（P<0.01）,而“CSE+30μg/ml RECK”和“CSE+60μg/ml RECK”组的中性粒细胞迁移数显著低于“CSE组”（P<0.01、P<0.001）,提示rh RECK减少CSE诱导的中性粒细胞迁移。“CSE组”中性粒细胞及培养上清中IL-6和IL-8的表达显著高于对照组（P<0.01、P<0.05）,而“CSE+RECK组”中性粒细胞及培养上清中IL-6和IL-8的表达均明显低于CSE组（P<0.05）,提示rh RECK抑制CSE诱导的中性粒细胞IL-6和IL-8的增加。“CSE组”中性粒细胞MMP-9 m RNA和蛋白水平与对照组比较都显著升高（P<0.001、P<0.01）,而“CSE+RECK”组中性粒细胞MMP-9的表达显著低于“CSE组”（P<0.01）,提示rh RECK抑制CSE诱导中性粒细胞产生MMP-9。结论:1.RECK在COPD患者（肺组织、血浆、痰液）和CSE刺激的BEAS-2B中表达减低,且COPD患者血浆中RECK蛋白表达与肺功能指标和炎症因子存在相关性。2.rh RECK可抑制CSE诱导的中性粒细胞炎症和迁移,这可能与其对MMP-9的表达调控有关。