黑果腺肋花楸花色苷分离纯化、结构鉴定及其抗氧化活性研究

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黑果腺肋花楸是原产于美国东北部的一种药食兼用的落叶灌木,其果实含有极为丰富的花色苷类物质。花色苷是一种具有极强抗氧化活性的天然色素。本文以产自辽宁海城市的黑果腺肋花楸鲜果为原料,对其花色苷的提取纯化工艺、稳定性、化学结构和抗氧化活性进行了系统的研究,主要结论如下:采用溶剂提取法和超声波辅助提取法对黑果腺肋花楸花色苷进行提取工艺条件研究。通过响应面试验对提取条件进行了优化,在最佳提取工艺条件下溶剂提取法花色苷得率为0.75 g/100 g,超声波辅助提取法花色苷得率为0.79 g/100g。通过筛选确定了最适合黑果腺肋花楸花色苷纯化的大孔吸附树脂为HP-20,优化了动态吸附解吸条件,确定最佳纯化工艺参数为:上样液pH为2,上样液质量浓度为0.6 mg/mL,解吸液为体积分数是40%的乙醇(含0.5%乙酸),吸附和解吸流速均为1 mL/min,色价由处理前的14.3提高到121.5。系统研究了黑果腺肋花楸花色苷的稳定性,试验表明:黑果腺肋花楸花色苷在酸性避光环境能够保持稳定,环境条件变化时其稳定性容易受到温度、Cu2+、Al3+、Fe3+金属离子和氧化剂、还原剂的影响。通过紫外光谱、液相色谱和超高效液相色谱-质谱联用的对黑果腺肋花楸花色苷组成进行分析,试验表明:黑果腺肋花楸中含有4种花色苷单体,即矢车菊素-3-半乳糖苷(68.68%),矢车菊素-3-阿拉伯糖苷(25.62%),矢车菊素-3-木糖苷(0.42%)和矢车菊素-3-葡萄糖苷(5.28%)。试验评价了黑果腺肋花楸总花色苷及其制备单体的抗氧化活性。抗氧化能力大小依次是矢车菊素-3-半乳糖苷>总花色苷>矢车菊素-3-阿拉伯糖苷>矢车菊素-3-葡萄糖苷,四种花色苷样品的活性均大于Vc,在清除过氧阴离子及DPPH试验中,其自由基清除能力大小跟抗氧化活性结果类似。研究了黑果腺肋花楸花色苷对UVA辐射诱导细胞凋亡影响,试验结果表明:花色苷最佳添加量为125μg/m L,在此情况下,细胞MMP-1的分泌量与对照相比减少60.2%。
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