以微小牛蜱饥饿幼蜱为材料,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增了微小牛蜱Bm86基因,并将其与真核表达载体pPIC9K进行重组;电转化毕赤酵母后,用0.5%甲醇进行诱导表达,通过SDS-PAGE和Westernblot方法对培养上清中的表达产物进行分析。结果表明:本试验自从微小牛蜱中成功克隆了Bm86基因,它与自GenBank上下载的国外发表的Bm86基因的同源性达97.4%,并构建了真核表达载体pPIC9K-Bm86,转化后经PCR证实目的基因已整合到毕赤酵母染色体中。通过甲醇诱导,重组菌株高效地分泌表达了Bm86蛋白,表达浓度为0.36mg/mL,占分泌总蛋白质的32%。经初步纯化,对表达产物的性质鉴定表明,其分子量约为68KD,具有免疫活性。该研究为大量获得重组Bm86蛋白,研制微小牛蜱分子疫苗奠定基础。　为了自微小牛蜱获得新的免疫相关基因,构建了微小牛蜱cDNA文库。从微小牛蜱幼蜱研磨物中提取总RNA,并分离纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,接着在其两端加EcoRⅠ/Hind　Ⅲ定向接头;然后将所产生的cDNA分子用Mini Column Fractionation　凝胶过滤柱纯化后定向克隆到λSCREEN载体的EcoRⅠ和HindⅢ的双酶切位点之间,体外包装后得到我国微小牛蜱幼虫cDNA文库。经测定,所构建的表达文库的容量为4.5×105pfu/ml,扩增后的文库库容量为7.2×1010pfu/ml,重组率为97%,这说明所构建微小牛蜱幼虫cDNA表达文库库容量大、重组率高,为进一步分离其功能性抗原基因奠定基础。