HPLC-ICP-MS法测定生物材料中有机锡化合物

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目的:有机锡化合物种类繁多,性质各异,生物样品的处理比较繁琐,目前国内外对生物材料中甲基锡和乙基锡化合物的检测报道相对较少,缺乏有机锡化合物的职业接触限值的资料以及诊断依据,因此选择合适的提取、分离和检测方法至关重要。本课题通过建立尿样和全血样品中4种有机锡化合物检测的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)法,为制定不同种类有机锡的职业接触限值提供科学依据。方法:尿样5倍稀释经0.22μm水相滤膜过滤后;液相色谱条件为:色谱柱为Ruby@C4(150 mm x 3 mm i.d,3μm),流动相为甲醇-3%乙酸水溶液(含0.25 mM的环庚三烯酚酮),流速为0.3 mL/min;柱温30℃;ICP-MS定量测定。全血中有机锡化合物在酸性条件下经乙腈水溶液沉淀蛋白后经0.22μm有机相滤膜过滤;液相色谱条件为:色谱柱为Ruby@C4(150mm x 3 mm i.d,3μm),流动相为甲醇-4%乙酸-水溶液(含0.25 mM的环庚三烯酚酮),流速为0.3 mL/min;柱温30℃;ICP-MS定量测定。结果:尿样中4种有机锡化合物呈现良好的线性关系(R~2≥0.998),DMT、TMT、DET和TET的线性范围分别为18.36~550.80μg/L、17.40~522.00μg/L、27.66~829.80μg/L和20.43~612.90μg/L。DMT、TMT、DET和TET的检测限分别为12.24、11.60、18.44和13.62μg/L,在低、中、高三个浓度测得其平均回收率均大于90%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。全血中的DMT、TMT、DET和TET线性范围分别为30.60~550.80μg/L、29.00~522.00μg/L、46.10~829.80μg/L和34.05~612.90μg/L,R~2≥0.997μg/L,DMT、TMT、DET和TET的检测限分别为21.40、20.30、32.27和23.80μg/L,在低、中、高三个浓度测得其平均回收率均大于85%,RSD均小于10%。用所建立的方法对某塑料厂工人9份尿样和全血中的有机锡含量进行检测,结果显示9份工人尿样和全血中部分检出有机锡化合物。由于GC-MS不能区分乙基锡的形态,因为衍生产物均为乙基烷基锡,而HPLC-ICP-MS可同时区分甲基锡和乙基锡化合物的形态。该结果同气相色谱-质谱法(GC-MS)比较,利用SPSS软件21.0对两种方法进行配对设计资料的符号秩和检验分析,按α=0.05水准,其P﹥0.05,结果说明两种方法测定尿样和全血中的DMT和TMT结果无差别。进一步说明HPLC-ICP-MS测定尿样和全血中有机锡化合物是准确可靠的,可用于接触人群尿样和全血中有机锡化合物的分析测定。结论:本文所建立的尿样和全血中4种有机锡化合物的HPLC-ICP-MS法简单、灵敏、准确,各项技术指标均满足生物材料分析方法的检测要求,可用于实际接触人群中有机锡化合物的检测。
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