【摘 要】
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目的:探讨洗心汤对AD模型大鼠的空间学习记忆能力、神经炎性反应相关蛋白表达及肠道菌群结构的影响,从脑肠轴视觉初步探索洗心汤防治AD疾病的可能机制。方法:(1)选取48只健康SPF雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、洗心汤组,每组12只。除假手术组给予等量生理盐水,其余各组大鼠腹腔注射D-半乳糖联合双侧脑室注射Aβ25-35建立AD模型,连续灌胃给药4周。(2)采用Morris水迷宫实验观
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目的:探讨洗心汤对AD模型大鼠的空间学习记忆能力、神经炎性反应相关蛋白表达及肠道菌群结构的影响,从脑肠轴视觉初步探索洗心汤防治AD疾病的可能机制。方法:(1)选取48只健康SPF雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、安理申组、洗心汤组,每组12只。除假手术组给予等量生理盐水,其余各组大鼠腹腔注射D-半乳糖联合双侧脑室注射Aβ25-35建立AD模型,连续灌胃给药4周。(2)采用Morris水迷宫实验观察各组大鼠空间记忆能力。(3)HE染色观察不同组别大鼠脑组织病理学改变。(4)采用免疫组化法和蛋白印迹方法分别检测脑组织海马区Aβ1-42、GFAP、IBA-1表达情况。(5)ELISA法检测海马区TNF-α、IL-1β和IL-10的表达水平。(6)采用16s r RNA技术检测各组肠道菌群结构变化。结果:(1)Morris水迷宫实验结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(p<0.01),平台象限停滞时间、有效区域进入次数明显减少(p<0.01)。与模型组相比,洗心汤组逃避潜伏期时间缩短(p<0.01),在平台象限停滞时间、有效区域进入次数增加(p<0.05,p<0.01)。(2)HE染色结果显示:与假手术组相比,模型组海马区组织细胞染色较深,椎体神经数目较少,细胞带排列无序、稀疏,出现神经元丢失,游离细胞、细胞空洞,胞体不规则等形态学改变;与模型组相比,治疗组细胞形态大致较正常,神经元细胞排列较整齐,细胞空洞减少。(3)免疫组化结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠海马区Aβ1-42、GFAP、IBA-1表达水平上升(p<0.01)。与模型组相比,洗心汤组海马区Aβ1-42、GFAP、IBA-1蛋白表达量减少(p<0.01)。(4)蛋白印迹结果显示,与假手术组比,模型组大鼠海马去GFAP、IBA-1表达水平上升(p<0.01)。与模型组相比,洗心汤组海马区GFAP、IBA-1蛋白表达量减少(p<0.01)。(5)ELISA法结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠海马区的IL-1β、TNF-α含量增高(p<0.01),IL-10的含量降低(p<0.01);与模型组相比,洗心汤组大鼠海马区的IL-1β、TNF-α含量降低(p<0.01),IL-10含量明显升高(p<0.01)。(6)16s r RNA检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠肠道拟杆菌丰富增高,厚壁菌门、变形菌丰度减弱。与模型组相比,洗心汤组大鼠肠道厚壁菌丰富度升高,拟杆菌、变形菌丰度减少。结论:(1)洗心汤能够在一定程度上提高D-半乳糖联合双侧脑室Aβ25-35拟AD模型大鼠的学习记忆能力,减轻海马区Aβ斑块沉积和大脑组织病理改变。(2)洗心汤能够下调AD模型大鼠海马内炎性蛋白GFAP、IBA-1的表达,下调促炎性因子IL-1β、TNF-α的水平,上调抗炎因子IL-10水平,从而抑制炎症反应,发挥抗炎和神经炎症保护作用。(3)洗心汤在一定程度上可以逆向调节AD模型大鼠肠道菌群结构,调节肠道微生态的失衡。
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