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荸荠为莎草科多年生浅水草本植物,又称马蹄。荸荠皮中含有多种生物活性物质,其中生物黄酮的含量较高。黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性,它在抗心脑缺血、缺氧,增进人体代谢中的抗氧化功能以及缓解抑郁紧张症状等方面有显著效果。
论文探讨了荸荠总黄酮含量的测定方法,测定了荸荠各部位的总黄酮含量;建立了一条提取、分离、纯化荸荠黄酮的工艺路线;并对其体外抗氧化活性进行了研究。研究内容及结果如下:
1.探讨荸荠总黄酮含量测定方法
亚硝酸钠—硝酸铝显色法是一种较适于荸荠总黄酮含量的测定方法,该定量方法的稳定性、精密度、重现性好,加标回收率为98.286%。
2.确定荸荠中不同部位总黄酮含量规律
广州水马蹄皮中总黄酮含量明显高于其它部位,是马蹄浆和马蹄渣的两倍,而马蹄粉中总黄酮含量几乎为零。
3.荸荠黄酮的提取工艺研究
与常规的水浴浸提法相比,超声波辅助提取和微波辅助提取两种方法都能很好的提高荸荠皮中总黄酮的提取率,其中微波辅助提取效果更好,其最佳提取条件为:乙醇浓度为55.4%,料液比1:30,微波功率320W,微波3min,相同条件下提取2次,在此条件下总黄酮含量为2.365%。
4.荸荠黄酮粗提物的分离纯化工艺研究
荸荠黄酮粗提物经萃取、聚酰胺柱层析、制备性硅胶G薄层层析分离后得到两个黄酮单体,经薄层层析、熔点仪、高效液相色谱、紫外可见光谱、红外光谱、质谱和核磁共振波谱进行结构鉴定后,单体1为芦丁,单体2为新橙皮苷。
5.荸荠黄酮的抗氧化性能研究
建立了测定荸荠黄酮的抗氧化活性方法—DPPH法,测定波长为517nm,反应时间为30min。通过测定荸荠黄酮粗提物、分离纯化各部的抗氧化活性可知,微波提取法得到的粗提物(IC50为4.34ug/mL)活性优于另两种提取方法的粗提物,但弱于Vc(IC50为3.76ug/mL);微波粗提物萃取分离得到正丁醇相(IC50为3.62ug/mL)的活性强于粗提物,且稍强于Vc的活性;柱层析分离各部的活性相差较大;制备性薄层层析得到的两单体均有较强的活性,芦丁(IC50为3.35ug/mL)的活性强于Vc,而新橙皮苷(IC50为5.59ug/mL)的活性弱于Vc。