【摘 要】
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目的探讨SAPCD2在结直肠腺癌组织中的表达水平及其对结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法1.采用免疫组织化学方法检测结直肠腺癌组织,配对正常黏膜组织及腺瘤组织中SAPCD2的表达水平。采用定量Real-Time PCR及Western blot法检测结直肠腺癌组织及配对癌旁相对正常黏膜组织中SAPCD2的表达水平。2.构建靶向SAPCD2的慢病毒载体p LV-sh RNA SAPCD2/
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目的探讨SAPCD2在结直肠腺癌组织中的表达水平及其对结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法1.采用免疫组织化学方法检测结直肠腺癌组织,配对正常黏膜组织及腺瘤组织中SAPCD2的表达水平。采用定量Real-Time PCR及Western blot法检测结直肠腺癌组织及配对癌旁相对正常黏膜组织中SAPCD2的表达水平。2.构建靶向SAPCD2的慢病毒载体p LV-sh RNA SAPCD2/p LV-sh Control及过表达SAPCD2的慢病毒载体lenti-OE SAPCD2/control,分别转染人结直肠癌HCT116及RKO细胞,通过MTT、克隆形成及Celigo细胞计数实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。流式细胞术检测细胞周期分布。裸鼠实验检测细胞体内成瘤能力。结果1.免疫组织化学检测结果显示,与正常黏膜组织及腺瘤组织相比,结直肠腺癌组织中SAPCD2表达水平显著增高(P<0.001)且SAPCD2高表达者多位于左半结肠肿瘤(P=0.018)。性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、TNM分期、肠壁浸润程度及淋巴转移与SAPCD2蛋白的表达无关(P>0.05)。定量Real-Time PCR及Western blot结果显示,结直肠腺癌中的SAPCD2 m RNA及蛋白水平显著高于癌旁相对正常黏膜组织(P<0.001,P=0.045)。2.抑制SAPCD2表达后RKO及HCT116细胞增殖、迁移及侵袭的能力明显受到抑制(P<0.05),而过表达SAPCD2后RKO细胞增殖、迁移的能力显著增强(P<0.05)。流式细胞术结果显示,抑制SAPCD2表达后RKO及HCT116细胞G1/S期转化受到抑制(P<0.05),而过表达SAPCD2后RKO细胞G2/M期转化明显增强(P<0.05)。裸鼠成瘤实验结果显示,抑制SAPCD2表达后RKO细胞的成瘤能力显著下降(P<0.05)。结论SAPCD2在结直肠腺癌组织中高表达。在体外,SAPCD2表达升高能影响结直肠癌细胞的细胞周期的分布,并增强细胞的增殖、迁移及侵袭能力。在体内,抑制SAPCD2的表达能够抑制肿瘤细胞的成瘤能力。
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