背景:卵巢上皮性肿瘤是最常见的卵巢肿瘤，然而，女性生殖器官肿瘤中病死率最高的恶性肿瘤仍然是卵巢上皮性癌。卵巢上皮性癌来源于卵巢表面上皮，卵巢浆液性癌是卵巢上皮性癌最常见的组织学类型，卵巢上皮性癌还包括诸如粘液性癌、子宫内膜样癌、透明细胞癌等其它组织学类型。近年来，妇科专家及病理科专家对卵巢浆液性癌的分子发生机制、分子遗传学以及临床病理形态学进行了探索，大量研究提示卵巢浆液性癌存在二元论发病模型:根据发病机制不同，将卵巢浆液性癌划分为卵巢低级别浆液性腺癌和高级别浆液性腺癌，卵巢低级别浆液性腺癌的发生是一个多步骤过程，经过良性-交界性-低度恶性肿瘤的发病过程，存在前体病变;而卵巢高级别浆液性腺癌直接起源于卵巢表面上皮或包涵囊肿，也有研究显示起源于输卵管，不存在前体病变。　　 肿瘤的发生是一个多基因、多步骤突变的生物学行为，其发病过程涉及到原癌基因的激活和抑癌基因的失活，不同基因的突变以及不同强度的突变形成了各种各样的肿瘤。肿瘤是基因疾病，其生物学基础是基因的异常。致瘤因素使体细胞基因突变，导致正常基因失常，基因表达紊乱，从而影响细胞的生物学活性与遗传特性，形成了与正常细胞在形态、代谢与功能上均有所不同的肿瘤细胞。　　 根据二元论发病模型，卵巢低级别和高级别浆液性腺癌存在不同的遗传学基础，低级别浆液性腺癌以KRAS或BRAF基因突变为主（据报道约占67％），然而在高级别浆液性腺癌则主要以P53基因突变为主。在这两种浆液性癌的发生发展过程中，也存在一些起重要作用的癌基因与抑癌基因，也可能成为影响卵巢浆液性癌预后的相关因素，本研究通过研究BRMS1、RIZ1和SATB1在卵巢低级别与高级别浆液性腺癌发生发展中的表达，探讨两种级别浆液性腺癌发生机制及预后的差别，从而指导我们在临床工作中应用不同诊断及治疗方法，提高患者生存率。　　 乳腺癌转移抑制基因1(breastcancermetastasissuppressorl，BRMS1)是近年来被发现的一种肿瘤转移抑制基因，据报道，其与乳腺癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌等肿瘤转移相关，此基因与卵巢癌转移也存在相关性。视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因RIZ1(noblastomaprotein-interactingzincfingergene1)是由Buyse等应用Rb探针在对可与Rb结合蛋白质进行功能性筛选时分离出来的。研究表明，它是一种既存在PRdomain又有在锌指结构的抑癌基因蛋白质分子，具有控制细胞生长及抑制肿瘤发生的作用。SATB1(specialAT-richsequence-bindingprotein1)是一种组织特异性的核基质结合蛋白，参与形成染色质高级结构，并对组织特异性基因表达进行调控，SATB1能够通过促进染色质重塑、调节组蛋白乙酰化和甲基化水平等多种途径在全基因水平对基因的表达进行调控。　　 据研究，抑癌基因BRMS1以及RIZ1在人类许多恶性肿瘤都存在一定程度上的的表达降低或缺失，SATB1基因在多种恶性肿瘤的侵袭转移过程中发挥重要作用。本文对这三种基因在卵巢低级别及高级别浆液性腺癌中发展过程中的表达情况进行研究，并且进一步对卵巢浆液性癌二元论发病机制进行探讨，从而对不同级别卵巢浆液性癌的发病机制和预后评估进行比较，寻找合适的预后判断指标和治疗方案，提高不同级别浆液性癌患者的生存率。　　 目的:本文采用免疫组织化学方法检测正常卵巢组织、卵巢浆液性良性肿瘤、交界性肿瘤和卵巢低级别液性腺癌中BRMS1、SATB1和RIZ1蛋白表达的变化规律，并检测正常输卵管和卵巢高级别浆液性腺癌中BRMS1、SATB1和RIZ1蛋白表达的变化规律。探讨上述三种基因的表达变化规律及其在不同分级的卵巢浆液性癌发生中的可能作用机制，并探讨其与不同分级卵巢浆液性癌临床病理特征的关系和预后判断价值。同时运用Kaplan-Meier单因素生存分析，筛选影响卵巢浆液性癌预后的相关因素，Cox多因素生存分析比较各因素对预后影响的程度，并确定各因素的风险系数，并判断影响愈后的独立预测因素以及各个因素的预测价值，评估分析BRMS1、SATB1和RIZ1蛋白表达对判断不同分级卵巢浆液性癌预后的价值。　　 方法:　　 1.研究对象　　 选取2003年7月至2007年7月河北医科大学第二医院具有完整临床资料、经手术切除且病理证实并且随访记录完整的卵巢浆液性癌标本61例，卵巢浆液性交界性肿瘤18例，卵巢浆液性良性肿瘤48例，正常卵巢组织15例，正常输卵管组织10例。　　 2.免疫组织化学　　 采用二步法检测卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中BRMS1、RIZ1、SATB1和P53蛋白的表达情况。严格按照免疫组化二步法检测试剂盒操作步骤进行。磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照，用已知的阳性病理切片作为阳性对照。　　 3.生存分析:　　 对41例卵巢高级别浆液性腺癌和20例卵巢低级别浆液性腺癌患者进行随访，确定研究截止点36个月和60个月，Kaplan-Meier单因素以及Cox多因素分析进行统计分析，计算3年和5年生存率。分析BRMS1、SATB1、RIZ1和P53蛋白表达以及临床分期、病理分级、术后化疗情况与患者预后的关系，从而确定影响卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的相关因素，Cox多因素分析生存分析用于确定不同分级卵巢浆液性癌独立的预后因素及影响程度。　　 4.统计学处理　　 采用SPSS13.0软件进行统计学处理，计数资料比较采用行×列表资料的x2检验，多个样本率的两两比较采用分割法;Kaplan-Meier单因素生存分析，计算患者生存率，Log-Rank检验比较生存率间差异有无显著性，筛选预后相关因素，Cox多因素生存分析比较各因素对预后影响的程度，判断各因素是否为独立的预测因素及各因素的预测价值，确定各因素的风险系数。检验水准α=0.05。　　 结果:　　 1.P53蛋白在卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中的表达情况　　 20例卵巢低级别浆液性腺癌和41例高级别浆液性腺癌中，P53蛋白阳性表达率分别为30.0％和73.2％，统计分析表明，卵巢高级别浆液性腺癌中P53蛋白的表达明显高于低级别组，差异有统计学意义(P＜0.05)　　 2.BRMS1、RIZ1和SATB1蛋白在低级别浆液性腺癌中的表达情况　　 2.1BRMS1蛋白表达结果　　 正常卵巢组织、浆液性良性肿瘤、交界性囊腺瘤和低级别浆液性腺癌中，BRMS1蛋白的阳性表达率依次为93.3％、77.1％、55.6％和30.0％，其阳性表达率逐渐降低。统计结果显示:正常卵巢组和卵巢低级别浆液性腺癌组、浆液性良性肿瘤组和卵巢低级别浆液性腺癌组以及正常卵巢组与交界性囊腺瘤组之间存在差异，差异具有统计学意义(P＜0.05)，其余各组均无差异。　　 2.2RIZ1蛋白表达结果　　 正常卵巢组织、浆液性良性肿瘤、交界性囊腺瘤和卵巢低级别浆液性腺癌组织中，RIZ1蛋白阳性表达率依次为:86.7％、81.2％、50.0％和35.0％，阳性表达率逐渐降低。统计分析显示:卵巢低级别浆液性腺癌组和交界性囊腺瘤组阳性表达率比正常卵巢组和浆液性良性肿瘤组明显降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)，其余各组均无差异。　　 2.3SATB1蛋白表达结果　　 正常卵巢组织、浆液性良性肿瘤、交界性囊腺瘤和卵巢低级别浆液性腺癌组织中，SATB1蛋白阳性表达率分别为:0％、35.4％、55.6％和75.0％，阳性表达率逐渐升高。统计分析表明:正常卵巢组和卵巢低级别浆液性腺癌组、浆液性良性肿瘤组和卵巢低级别浆液性腺癌组、正常卵巢组和交界性囊腺瘤组以及正常卵巢组和浆液性良性肿瘤组之间存在差异，差异具有统计学意义（P＜0.05）。其余各组均无差异。　　 3.BRMS1、RIZ1和SATB1在高级别卵巢浆液性腺癌组织中的表达情况　　 3.1BRMS1蛋白表达结果　　 10例正常输卵管组织以及41例卵巢高级别浆液性腺癌中，BRMS1蛋白阳性表达率分别为80.0％和43.9％。统计分析表明卵巢高级别浆液性腺癌组BRMS1蛋白阳性表达率明显低于正常输卵管组织，差异有统讨学意义(P＜0.05)　　 3.2RIZ1蛋白表达结果　　 41例卵巢高级别浆液性腺癌中，RIZ1蛋白表达阳性率为46.3％，统计分析表明其明显低于正常输卵管组织(80％)，差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 3.3SATB1蛋白表达结果　　 41例卵巢高级别浆液性腺癌的SATB1蛋白表达阳性率为51.2％，10例正常输卵管组织的阳性率为10％。统计分析表明卵巢高级别浆液性腺癌组明显高于正常输卵管组，差异有统计学意义(P＜0.05)　　 4.卵巢低级别和高级别浆液性腺癌BRMS1、RIZ1和SATB1蛋白表达比较　　 4.1BRMS1在卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中的表达情况　　 卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中，BRMS1蛋白阳性表达率分别为30.0％和43.9％，统计分析表明，BRMS1在卵巢低级别与高级别浆液性腺癌中的表达无明显差异(P＞0.05)。　　 4.2RIZ1在卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中的表达情况　　 卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中，RIZ1蛋白阳性表达率分别为35.0％和46.3％，统计分析表明，RIZ1在低级别与高级别浆液性腺癌中的表达无明显差异(P＞0.05)。　　 4.3SATB1在卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中的表达情况　　 SATB1蛋白在卵巢低级别和高级别浆液性腺癌中，其阳性表达率分别为75.0％和51.2％，统计分析表明，SATB1在低级别与高级别中的表达无明显差异(P＞0.05)　　 5P53、BRMS1、RIZ1和SATB1蛋白表达与卵巢低级别和高级别浆液腺性癌预后的关系　　 5.1卵巢低级别和高级别浆液性腺癌的生存率比较　　 卵巢低级别浆液性腺癌组3年和5年生存率分别是85％和70％，卵巢高级别浆液性腺癌组3年和5年生存率分别是34.1％和12.2％，统计分析表明，两种分级浆液性癌其3年和5年生存率均有差别(p＜0.05)。　　 5.2P53蛋白表达与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 卵巢低级别浆液性腺癌中，P53蛋白阳性组和阴性组其3年和5年生存率均无明显差别(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，P53蛋白阴性组3年和5年生存率均高于阳性组，差异有统计学意义（P＜0.05）。　　 5.3BRMS1蛋白表达与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 卵巢低级别浆液性腺癌中，BRMS1蛋白阳性组和阴性组其3年和5年生存率均无明显差别(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，BRMS1蛋白阳性组3年和5年生存率均高于阴性组，差异有统计学意义(P＜0.05)　　 5.4RIZ1蛋白表达与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 卵巢低级别浆液性腺癌中，RIZ1蛋白阳性组和阴性组其3年和5年生存率均无明显差别(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，RIZ1蛋白阳性组3年和5年生存率均高于阴性组，差异有统计学意义(P＜0.05)　　 5.5SATB1蛋白表达与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 卵巢低级别浆液性腺癌中，SATB1蛋白阳性组和阴性组其3年和5年生存率均无明显差别(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，SATB1蛋白阳性组3年和5年生存率均低于阴性组，差异有统计学意义(P＜0.05)　　 6.不同临床分期与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 在卵巢低级别浆液性腺癌中，不同临床分期之间3年和5年生存率无统计学差异(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，临床分期较早组（Ⅰ、Ⅱ期）较临床分期较晚组（Ⅲ、Ⅳ期）其3年和5年生存率均高，差异有统计学意义(P＜0.05)。　　 7.术后不同化疗方式与卵巢低级别和高级别浆液性腺癌预后的关系　　 在卵巢低级别浆液性腺癌中，术后未化疗组、未正规化疗组及正规化疗组其3年和5年生存率无明显统计学差异(P＞0.05)。在卵巢高级别浆液性腺癌中，术后未化疗组、未正规化疗组及正规化疗组其3年和5年生存率存在差别，有统计学意义(P＜0.05)。　　 8.卵巢低级别和高级别浆液性腺癌Cox多因素生存分析　　 在卵巢低级别浆液性癌中，没有能够进入Cox比例风险回归模型的因素。在高级别组中，临床分期和术后化疗进入Cox比例风险回归模型。　　 结论:　　 1.卵巢高级别与低级别浆液性腺癌组相比，高级别组中P53蛋白阳性表达率高于低级别组，这一结果符合浆液性卵巢癌发生机制的二元论学说，同时也进一步证明卵巢高级别浆液性腺癌的发生与P53基因突变存在密切关系。　　 2.正常卵巢组织、囊腺瘤、交界性囊腺瘤和低级别浆液性腺癌中，BRMS1和RIZ1蛋白表达逐渐降低，而SATB1蛋白表达逐渐升高，提示三者参与了正常卵巢组织→浆液性囊腺瘤→交界性囊腺瘤→低级别浆液性腺癌的发病过程。　　 3.卵巢高级别浆液性腺癌中BRMS1和RIZ1蛋白表达降低，SATB1蛋白表达升高，提示BRMS1、RIZ1和SATB1也参与了高级别浆液性腺癌的发生。　　 4.BRMS1、RIZ1和SATB1在高级别与低级别之间的表达无明显差别，说明卵巢低级别和高级别浆液性腺癌的发生仍存在许多共同的分子基础。　　 5.卵巢高级别与低级别浆液性腺癌患者的3年和5年生存率有明显差别，低级别组的生存率明显高于高级别组，而且BRMS1、RIZ1和SATB1蛋白表达与低级别患者生存率无相关，但与高级别患者生存率存在明显相关。　　 6.卵巢低级别浆液性腺癌中，没有能够进入Cox比例风险回归模型的因素，卵巢高级别浆液性腺癌中，临床分期和术后化疗进入Cox比例风险回归模型。