挂榜山小鲵核型、Cyt b基因全序列及胚胎发育研究

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挂榜山小鲵(Hynobius guabangshanensis)属两栖纲(Amphibia),有尾目(Urodela),小鲵科(Hynobiidae),是沈猷慧等(2004)在湖南省祁阳县发现的小鲵属一新种。笔者于2005~2007年对挂榜山小鲵的核型、Cyt b基因的全序列及胚胎发育进行了研究。以挂榜山小鲵幼体的肾脏及骨髓细胞为实验材料,对挂榜山小鲵的染色体组型进行了研究。结果表明,挂榜山小鲵的染色体数目为2n=56,其核型公式为2n=56=24M+12SM+4ST+16m,臂数NF=96。其中12对为中部着丝粒染色体(M),6对为亚中部着丝粒染色体(SM),2对为亚端部着丝粒染色体(ST),其余8对为微小染色体(m)。未发现异型染色体对。采用特异性引物PCR扩增法,获得了挂榜山小鲵的线粒体细胞色素b基因(Cyt b)的长为1142bp的全序列,利用Jellyfish软件统计了其碱基组成。在此基础上结合GenBank中台湾小鲵、阿里山小鲵、东北小鲵、安吉小鲵和中国小鲵的同源序列,选用大鲵作为外群,采用邻接法构建了分子系统树。结果表明:我国产的6种小鲵构成一个单系群,可分为两支:台湾群和大陆群。阿里山小鲵和台湾小鲵构成台湾群,而大陆所产的4种小鲵构成大陆群,其中挂榜山小鲵和中国小鲵的亲缘关系最近。2005年1~2月,笔者在Nikon体视镜下对挂榜山小鲵的胚胎发育过程进行了观察,对不同发育时期进行了数码拍照。根据胚胎发育的外部形态及典型特征将挂榜山小鲵胚胎发育过程分为21个时期。在水温6.5~10℃的条件下,受精卵历时1134h孵化出膜,初孵幼鲵全长约16.50mm。
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