DEPDC7基因含有BRCC 3样蛋白的DEP(Disheveled,EGL-10和pleckstrin)结构域和Rho GAP(Rho-类小GTPase-激活蛋白)结构域两个潜在的功能域,在信号转导、细胞极性确定、细胞锚定等生物过程中起到重要作用。乳腺是哺乳动物的泌乳器官,主要作用是乳成分合成和分泌。本课题组前期通过对四乳头湖羊和两乳头湖羊的血清样本进行全基因组重测序分析及验证,发现DEPDC7基因可作为湖羊四乳头性状的候选基因。但是,目前对DEPDC7基因调控四乳头湖羊乳腺发育的研究报道很少。因此本研究对四乳头湖羊乳腺上皮细胞过表达DEPDC7引起的差异表达m RNA进行分析,为更好的探索DEPDC7基因在四乳头湖羊乳腺上皮细胞中的生物学功能研究提供新的试验依据。本研究以四乳头湖羊乳腺上皮细胞为研究对象,通过构建DEPDC7基因的过表达载体,转染四乳头湖羊乳腺上皮细胞,进行了绝对定量转录组测序,并进行聚类分析、GO和KEGG通路分析,以期阐明DEPDC7对四乳头湖羊乳腺上皮细胞发育过程中发挥的生物学功能。主要研究结果如下:1.本研究成功分离纯化培养得到四乳头湖羊的乳腺上皮细胞,经免疫荧光技术鉴定其为阳性,并且状态良好,可以确定所获得的细胞为四乳头湖羊乳腺上皮细胞;2.本研究采用绝对定量转录组测序技术检测并比较了四乳头湖羊乳腺上皮细胞过表达DEPDC7引起的差异表达m RNA,筛选出了116个显著差异表达的基因,其中104上调,12个下调,表明这些基因的表达量受到DEPDC7的调控或影响;3.对差异表达的基因进行GO和KEGG信号通路分析,发现有116个基因参与四乳头湖羊乳腺上皮细胞的生长发育并差异表达,为进一步研究DEPDC7基因的生物学功能提供了基础。综上所述,本研究发现了四乳头湖羊乳腺上皮细胞中过表达DEPDC7引起的116基因在m RNA水平差异表达,证实了DEPDC7基因参与四乳头湖羊乳腺上皮细胞生长发育。