丙泊酚对BALB/c小鼠坐骨神经损伤后相应脊髓节段PSD-95表达的影响

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目的观察丙泊酚对坐骨神经离断伤小鼠L4-6脊髓节段PSD-95表达的影响。方法选择清洁级健康雄性BALB/c小鼠144只,体重20±2g,8周龄,采用随机数字量表法将小鼠分为3组:假手术组(S组)、模型组(M组)、丙泊酚组(P组),每组48只,观察时间点分别为1W、2W、4W、8W,每个时间点为4只,通过离断右侧坐骨神经后进行端端吻合来建立经典坐骨神经损伤模型。P组造模成功后腹腔注射丙泊酚50mg·kg-1·d-1,M组腹腔注射等体积生理盐水,连续干预7天。采用Real-time PCR法与Western Blot法检测小鼠L4-6脊髓节段PSD-95 mRNA及蛋白的表达;通过LFB染色观察小鼠损伤侧坐骨神经髓鞘形态学变化;通过TUNEL法染色标记小鼠L4-6脊髓节段神经元细胞并统计神经元凋亡数目情况;分别称取每只小鼠右侧与左侧腓肠肌肌肉湿质量,并计算腓肠肌肌肉湿质量残存率。结果1.PSD-95 mRNA结果显示:与S组比较,在1W、2W、4W时M组PSD-95 mRNA表达上调(P<0.05);与M组比较,1W、2W、4W时P组PSD-95mRNA的表达明显下调(P<0.05);2.PSD-95 Western Blot结果显示:1W时M组与P组PSD-95蛋白表达开始上调;2W时M组与P组PSD-95蛋白表达均达到高峰;与S组比较,2W与4W时M组PSD-95蛋白表达明显上调(P<0.05);与M组比较,2W与4W时P组PSD-95蛋白表达下调(P<0.05)3.LFB染色显示:与S组比较,M组损伤段坐骨神经髓鞘分布杂乱、髓鞘厚度不均及轮廓不完整;与M组比较,P组髓鞘形态、厚度及轮廓规整程度均有所改善;4.TUNEL法染色标记小鼠脊髓L4-6节段神经元凋亡结果显示:随着术后时间的延长,脊髓L4-6节段神经元细胞凋亡数目逐渐减少(P<0.05);与S组比较,M组与P组脊髓神经元凋亡数目增加(P<0.05);与M组比较,P组脊髓L4-6节段神经细胞凋亡数目明显减少(P<0.05)。5.腓肠肌湿质量残存率结果显示:与S组比较,2W、4W、8W时M组腓肠肌肌肉湿质量残存率下降(P<0.05);与M组比较,2W、4W、8W时P组腓肠肌湿质量残存率升高(P<0.05)结论:1.丙泊酚促进神经功能恢复的可能机制是通过抑制PSD-95的表达。2.丙泊酚能够减少坐骨神经损伤后相应脊髓节段神经元的凋亡。
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