血清抑制素B在鉴别梗阻性与非梗阻性无精子症中的应用价值

来源 :北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jjjjedu
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目前,临床上还没有鉴别OA和NOA敏感性和特异性都非常高的血清学标志物。研究血清INHB的鉴别效果是当务之急。INHB自被发现迄今己有七十余年。在己经完成的INHB试验研究中,发现其预测精子发生状态效果较好,是一个非常有临床应用前景的激素。1NHB研究的目的是预测翠丸内精子发生的状况,从而为男性不育症的临床诊治提供依据。然而,抑制素B在国内男性的正常参考值范围以及在鉴别OA和NOA的应用价值这两个问题一直没有得到解决。由于血清INHB在不同种族差异具有显著性,因此国外的正常参考范围以及鉴别OA和NOA的切点不能在国内得以应用。尽管国内一些临床研究给出了参考范围,但是均由于标本量不够以及实验方法落后等原因而没有被普遍采用。 FSH、精浆中性a-Glu在OA和NOA患者之间存在差异。近年来,国外越来越多的证据显示,INHB比FSH更能够预测精子的发生。通过研究比较血清INHB和FSH、精浆中性a-Glu在预测OA或者NOA的敏感性和特异性,可以阐明1NHB在鉴别OA和NOA的应用价值,从而为更科学的应用INHB提供理论指导与实验依据。目的:本研究通过测定血清抑制素B(INHB)并与卵泡刺激素(FSH)和精浆中性a-葡糖昔酶( a-Glu)等经典指标比较,评价INHB在鉴别诊断梗阻性(OA)和非梗阻性无精子症困OA)中的应用价值,并对攀丸精子发生障碍作出预判。方法健康生育男性组((n=60),以翠丸活检为金标准确定OA组(n=39)和NOA组((n=77),留取血液和精液标本,进行精液常规分析,检测血清INHB, FSH和精浆中性a-Glu的水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线法,通过计算ROC曲线下面积,确定切点值并分析评价检测指标的敏感性和特异性。结果本实验室健康育龄男性血清INHB的95%参考值范围为:20.37206.21 pg/ml。血清INHB, FSH、精浆中性a-Glu、血清INHBIFSH比值以及INHB+FSH联合在OA组与NOA组之间均差别显著,具有统计学意义(P<0.01)。其中血清INHB的曲线下面积最大,为0.985,诊断价值最高,敏感性为97.4%,特异性为92.2%,切点值为49.89pg1ml。结论血清INHB L血清FSH、精浆中性a-Glu、血清INHB/F SH比值、或INHB+FSH联合指标在鉴别OA与NOA方面具有最佳的敏感性与特异性。Y染色体上的无精子症因子(azoospermiafactor, AZF)基因位点的微缺失会导致非梗阻性无精子症(non-obstructive azoospermia, NOA)的发生。因此,NOA患者有必要进行Y染色体微缺失检测以明确病因。Y染色体微缺失可以通过PCR技术进行检测。尽管一些研究通过单重或者多重PCR技术研究了不同男性人群Y染色体从2个到22个位点的微缺失,然而,检测技术以及检测位点一直是大家争论的议题。己有研究发现NOA患者人群会发生Y染色体微缺失,缺失率从1%到55%各不相同。检测结果差异产生的可能原因与以下因素有关:(1)研究对象选择标准不同;(2)检测所用STSs标记位点密度和位置不同;(3)检测方法不同;(4)群体遗传背景和环境不同。目的:评价多重PCR和单重PCR检测Y染色体微缺失的优劣,检测6个位点和15个位点的利弊,分析NOA患者Y染色体微缺失的患病率。通过研究患者是否有Y染色体微缺失的状况,可以明确病因,从而为医生临床诊疗提供指导和实验依据。方法:将15个经典微缺失位点分成6组,摸索各组进行多重PCR的最佳反应条件;摸索15个引物进行单重PCR的反应条件;继而分别进行NOA患者DNA的检测,确定每位患者Y染色体微缺失的情况。再运用统计学方法进行多重PCR和单重PCR的比较;以及比较经典的巧个微缺失位点和传统的6个微缺失位点的检出率。结果:获得各组进行多重PCR的最佳反应条件。73名患者经传统的6个微缺失位点的检测和巧个微缺失位点的检测发现:两者在微缺失人数和位点缺失数目上的比较均具有统计学差异(x L=5.06 P<0.05和x=15.06, P<0.0)。单重PCR和多重PCR的检测率进行比较后发现,微缺失人数没有统计学差异(x==2.25, P>0.05),位点数目的差异在统计学上具有显著性(x r=22.04, P<0.05)。在12名NOA且存在Y染色体微缺失的患者中,有1,2,3,6名患者分别缺失4,3,2,1个位点。结论:通过检测15个微缺失位点发现NOA患者中Y染色体微缺失的发生率为16.44%015个位点的Y染色体微缺失检测比6个位点的检测更有临床意义和价值。Y染色体微缺失的多重PCR检测会导致假阴性结果,需要单重PCR进行确认。研究还发现AZFb十c的缺失对生精功能损伤可能较为严重、Y染色体微缺失和翠丸体积无相关性以及不同PCR仪上的反应条件不一定能够通用。
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