A型流感病毒(Influenza A virus)属于正粘病毒科流感病毒属，能够引起鸟类、多种禽类、人类和哺乳动物的流行性感染。据估计，全球每年流感患者死亡人数高达60万人。现行的疫苗通常由灭活病毒、减毒毒株或者重组表面糖蛋白组成，不但效果不好，而且因流感病毒表面抗原的不断变化，疫苗需要不断进行调整。而抗流感病毒的药物因其强烈的副作用和可能导致抗药毒株的出现，其作用受到限制。因此寻找新的抗病毒方法对流感的治疗意义重大。 RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是1998年首先在线虫发现的由双链RNA介导的序列特异性的转录后基因沉默机制。RNA干扰是一种基因沉没的重要工具。能够介导特定RNA降解的小干扰RNA(Small Interfering RNA，siRNA)已经成为抑制病毒复制的又一选择。 本研究以A型流感病毒A/PuertoRico/8/34(H1N1)毒株进化上较为保守的NP、M1和PB1基因为靶标设计了15条小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，并将它们连接到表达载体pU6P上，构建了shRNA表达载体pU6P—siNP，pU6P—siM1，pU6P—siPB1。综合应用分子生物学和细胞生物学等研究方法和技术手段进行研究，确定了流感病毒RNA干扰实验的有效靶基因并且筛选出对流感病毒复制有良好抑制效果的siRNA。 通过鸡胚尿囊腋HA血凝实验鉴定出针对PB1基因和NP基因的siRNA对A型流感病毒(H1N1)的繁殖有抑制作用，部分有效的siRNA能使病毒HA滴度降低10倍以上；半定量PCR结果表明，siRNA的注入可以明显降低病毒mRNA的丰度，说明siRNA有效的促进了病毒mRNA的降解；流式细胞实验和Weston Blotting实验显示siRNA可以明显降低病毒蛋白的表达；动物实验表明，给入siRNA可以使成鸡避免死于A型流感病毒的感染。 本研究的结果表明，siRNA可以有效抑制流感病毒的复制，为流感病毒乃至其它之病病毒的防治提供了新的思路。