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目的:神经退行性疾病是危害中老年健康的主要疾病之一,其中最为常见为阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)和帕金森症(Parkinson Disease,PD)。目前,临床上治疗神经退行性疾病的药物大多为化学药,但化学药毒副作用大容易引起并发症。神经细胞移植和补肾类中药在治疗神经疾病中由于疗效持久、毒副作用小,已经成为近年来治疗神经系统疾病研究的热点。在细胞移植治疗中,神经祖细胞(Neural progenitor cells,NPCs)是常用来进行移植的种子细胞,是一种具有自我更新能力和多种分化潜能的神经细胞,但是从胚胎或神经组织获得的NPCs在临床应用中也存在细胞来源少、组织免疫排斥、伦理学等问题,因此通过体外诱导获得高纯度、高活性的NPCs是解决这一问题的关键。补肾中药近年来在神经系统性疾病的治疗中也显著成效,因此筛选具有神经保护的中药也是为神经系统性疾病患者疾病治疗研究提供理论依据。方法:本论文首先在体外将小鼠诱导多能干细胞(Mice induced pluripotent stem cells,miPSCs)诱导分化为NPCs细胞,在分化过程中加入了维甲酸A(Retinoic Acid,RA)、表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)和成纤维生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)等诱导因子,并对诱导后的NPCs细胞进行分化潜能鉴定;利用诱导的NPCs细胞在2D条件下进行了补肾中药提取物活性筛选;在2D条件下筛选出鹿茸多肽在两种疾病模型下对NPCs细胞均有保护作用,利用聚乙烯醇/海藻酸钠/鹿茸多肽水凝胶复合物对NPCs细胞进行3D培养,通过显微镜和死活染色观察复合水凝胶对NPCs细胞的生物相容性。并在3D条件下建立CORT疾病模型,检测鹿茸多肽在3D条件下对NPCs细胞的保护作用结果:结果显示通过体外诱导的NPCs细胞呈PAX6阳性表达,且可以近一步分化为少突胶质前体细胞(Oligdendrocyte progenitor cells,OPCs);中药提取物在2D条件下对NPCs细胞增殖的实验中,不同中药提取物在浓度范围内均能不同程度促进细胞增殖,在中药提取物对NPCs细胞疾病损伤保护实验中,以100 μM的皮质酮(CORT)和1mM谷氨酸(Glu)损伤NPCs细胞,建立两种体外模拟神经疾病模型,采用MTT法检测细胞存活率,结果显示鹿茸多肽提取物在0.25-1 mg/ml浓度范围内对NPCs细胞的CORT损伤有保护作用,淫羊藿在50-100 μg/ml浓度范围内对NPCs的CORT损伤有保护作用;在Glu损伤模型中,鹿茸多肽在0.5 mg/ml时对NPCs细胞有保护作用;3D培养结果表明水凝胶复合物对NPCs有很好的生物相容性,水凝胶复合物在疾病模型下能够保护和促进NPCs细胞向少突胶质前体细胞(OPCs)、神经元(Neuron)、星形胶质细胞(Astrocyte)的分化。结论:综上所述,miPSCs可以成功诱导为NPCs细胞,诱导后的NPCs细胞可以用来中药提取物的活性筛选。聚乙烯醇/海藻酸钠/鹿茸多肽水凝胶复合物在3D培养条件下对NPCs细胞有很好的生物相容性,能够保护和促进细胞增殖和分化。