氯沙坦(losartan)对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

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特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis ,IPF)是一种原因不明,以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱,最终导致以肺间质纤维化为病理特征的免疫介导的炎症性疾病。其预后较差,病死率高,确诊后的平均生存期为四年左右,目前尚无特效的治疗方法。因此寻找治疗IPF的方法尤其是治疗药物,已成为主要研究方面。目的:观察肺纤维化大鼠肺匀浆中是否存在所测氧化指标的变化;氯沙坦对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预机制和作用;和传统药物糖皮质激素进行对照,进一步探讨氯沙坦对肺纤维化的治疗效果。方法:选取清洁级雄性SD大鼠60只,体重200-250克,随机分为:(1)正常对照组(A组):6只,气管胃管内均给生理盐水第7天处死。(2)博莱霉素组(B组):18只,气管内一次性注入BLMA5(5mg/kg),于当天开始每天胃管内注入生理盐水1ml/只,与造模后第7、14、28天各处死6只。(3)氯沙坦组(C组):18只,气管内注入0.2-0.3mlBLMA5后于当天每只胃管内给氯沙坦10mg/kg,一日一次,与造模后7、14、28天各处死6只。(4)地塞米松组(D组):18只,气管内注入0.2-0.3mlBLMA5后第1天每只腹腔内注射地塞米松3mg/kg,一日一次,与造模后7、14、28天各处死6只。各组大鼠处死前行肺功能检查,记录用力肺活量,肺顺应性,行心脏放血处死,右肺用手术线结扎,取右肺中叶用10%甲醛固定,进行HE染色观察肺内炎症变化,Masson染色观察肺内胶原,并进行Szapiel病理观察肺泡炎分级和纤维化的动态变化。切除左肺,制备匀浆。测量匀浆中SOD、MDA、MPO和NOS的含量,计量资料结果及病理半定量资料用SPSS11.5统计软件进行分析。结果:1肺组织匀浆中SOD活力的变化:造模7天、14天时,B组肺匀浆中SOD活力显著低于A组(P<0.01),28天时,A组活力最高,B组活力最低,各组间无显著差异。D组7天、14天时,肺组织中SOD活力显著高于B组(P<0.05),C组各组均较D组升高,C7较D7显著升高(P<0.05)。2组织匀浆中MDA含量的变化:造模7天、14天时B组肺匀浆中MDA含量高于A组(P<0.01),28天时,A组含量最低,B组含量最高,各组间无显著差异。D组肺组织中含量均低于B组,D7与B7比较,显著降低(P<0.01),C组各组均较D组降低,C7较D7显著降低(P<0.01)。3组织MPO含量的变化:造模7天时,B组肺匀浆中的MPO含量为最高峰,而后逐渐下降,7天、14天较A组显著升高(P<0.01),28天时A组含量最低,B组含量最高,各组间无显著差异。D组:肺组织匀浆中的MPO含量7天、14天时均较B组显著降低(P<0.01)。C组各组均较D组降低,但无统计学差异。4肺组织NOS含量的变化:造模第7天时B组肺匀浆中的NOS含量为最高峰,而后逐渐下降,7天、14天时较A组显著升高(P<0.01),28天时A组含量最低,B组含量最高,各组间无显著差异。D组:肺组织匀浆中的NOS含量7天、14天时均较B组显著降低(P<0.01)。C组各组均较D组降低,C7较D7显著降低(P<0.05)。5肺功能的变化:5.1用力肺活量的变化:B组肺组织的用力肺活量显著低于A组(P<0.01),D组肺组织的用力肺活量显著高于B组(P<0.05),C组肺组织的用力肺活量显著高于D组(P<0.05)。5.2肺顺应性的变化:B组肺组织的顺应性显著低于A组,D组肺组织的顺应性显著高于B组(P<0.05),C组肺组织的顺应性显著高于D组(P<0.05)。6肺组织病理分析结果:B组各时间点组肺泡炎程度显著高于A组正常对照组(P<0.01),B14和B28组肺纤维化程度显著高于A组正常对照组(P<0.01),表明动物模型复制成功。D组肺泡炎及纤维化程度较B组减轻,D7与B7比较,肺泡炎程度显著减轻(P<0.01),D14与B14比较,肺泡炎程度显著减轻(P<0.05),D28纤维化程度较B28显著减轻(P<0.05),C组各组较重级数中数目均较D组较少,但无统计学差异。结论: 1.在博莱霉素所致大鼠纤维化过程中,存在肺组织SOD活力下降,MDA、MPO、NOS含量上升,肺顺应性及FVC下降。2.应用氯沙坦能够减轻博莱霉素大鼠肺纤维化过程中炎症及纤维化的程度,能够使肺组织SOD活力升高,MDA、MPO、NOS含量下降,肺顺应性及FVC升高。3.氯沙坦能够减轻大鼠肺纤维化,可能与其抗氧化,改善肺通气功能有关。
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