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目的:研究当归芍药散水提液(DSS)对APP/PS1阿尔茨海默病双转基因模型小鼠脑内二十二碳六烯酸(DHA)代谢及DHA代谢信号通路神经炎症、氧化应激的作用和认知功能的影响,探讨DSS治疗AD的作用机制,为AD治疗提供新方法。方法:实验一:当归芍药散单味药以及全方水提液的质量控制研究。按照《中国药典》(2015年版)标准,采用高效液相色谱法测定白芍中芍药苷、当归中阿魏酸、川芎中阿魏酸以及泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量;采用液质联用技术定性分析当归芍药散全方提取液的主要活性成分,同时采用高效液相色谱法对全方中七种主要成分进行定量分析。实验二:当归芍药散对APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑重指数、血脂水平以及学习记忆的影响。选择6月龄APP/PS1双转基因小鼠(雄性),用Morris水迷宫初筛后,淘汰不合格动物后随机分为模型组(16只)、当归芍药散高、中、低剂量组以及阳性药组各11只,选择同背景同月龄转基因阴性雄性小鼠(16只)作为正常对照组。根据前期预实验结果,给予小鼠每天灌胃的当归芍药散高、中、低剂量组分别为6.4 g/kg、3.2 g/kg、1.6 g/kg。阳性药组(多奈哌齐)给药剂量为3 mg/kg。各给药组给药量为10 ml/kg体重,模型组和对照组给予生理盐水10 ml/kg体重。每天灌胃一次,连续给药一个月后开始行为学测试。行为学测试结束次日,小鼠称重,10%的水合氯醛腹腔注射麻醉,摘眼球取血离心分离血清,对血清中的TC、TG、LDL-C以及HDL-C进行检测;分离全脑并称重,计算脑重指数。实验三:当归芍药散对APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑内DHA代谢以及神经炎症、氧化应激的影响。采用液质联用技术对DHA经酶代谢产生的未酯化的DHA进行含量测定;采用Western blotting法对DHA从细胞膜释放、代谢的酶i PLA2、15-LOX以及参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2、COX-1、COX-2、5-LOX和12-LOX蛋白表达量进行检测;ELISA测定炎症介质PGE2,TXB2和LTB4;试剂盒检测小鼠脑内抗氧化酶MDA、SOD、GSH以及ROS指标。结果:实验一:当归芍药散单味药以及全方水提液的质量控制研究。当归芍药散中白芍的芍药苷、当归中阿魏酸、川芎中阿魏酸以及泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量均符合《中国药典》(2015年版)标准。通过飞行时间高分辨质谱共检测到当归芍药散全方提取液78种主要成分(负离子模式下检测到34种成分,正离子模式下检测到44种成分)。在进行含量测定的芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、没食子酸、阿魏酸、川芎内酯I、川芎内酯A七种成分中,含量分别为1.76、12.15、0.68、1.17、0.29、0.46、0.19 mg/g浸膏,其中以芍药苷含量最高。实验二:当归芍药散对APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑重指数、血脂水平以及学习记忆的影响。1.AD模型小鼠脑重指数结果表明:与对照组相比,模型组的脑比重有所降低(P<0.01);DSS高、中、低以及阳性药对照组的脑比重有所增加(P<0.01)。2.AD模型小鼠血脂水平检测结果表明:与对照组相比,模型组的TC、TG和LDL-C均有所上升(P<0.01),HDL-C有所下降(P<0.01);DSS高、中、低剂量组以及阳性药组可明显改善AD模型小鼠的血脂水平(P<0.05或P<0.01)。3.AD模型小鼠行为学结果表明:(1)Morris水迷宫定位航行结果提示:与正常组相比,同背景同月龄的APP/PS1模型组逃避潜伏期明显延长(P<0.05);阳性药组(P<0.05)以及DSS高、中、低组(P<0.01)可明显缩短AD模型小鼠的逃避潜伏期。(2)Morris水迷宫空间探索结果提示:与对照组相比,模型组第一次穿越平台时间明显延长(P<0.01)、穿越平台次数明显减少(P<0.01);阳性药组、DSS高,中,低组可明显缩短AD模型小鼠第一次穿越平台的时间(P<0.01)、增加其穿越平台的次数(P<0.05或P<0.01)。(3)Y迷宫结果提示:与对照组相比,模型组在三个臂中的交替百分比明显减少(P<0.01);DSS高,中,低组均可提高模型组小鼠在三个臂中的交替百分比(P<0.01)。(4)旷场实验结果提示:与对照组相比,模型组进入中心区域的时间明显减少(P<0.01);阳性药组、DSS高、中,低组均可提高模型鼠在中心区域活动的时间(P<0.01)。(5)条件恐惧实验结果提示:与对照组相比,模型组凝滞时间明显较短(P<0.01);阳性药组、DSS高,中,低剂量组组均可提高模型鼠的凝滞时间(P<0.01)。实验三:当归芍药散对APP/PS1双转基因AD模型小鼠脑内DHA代谢以及神经炎症、氧化应激的影响。与模型组相比,阳性药组、DSS高,中,低组小鼠脑内未酯化的DHA含量明显增多(P<0.05);除DSS低剂量组外阳性药组、DSS高、中剂量组可明显上调小鼠海马、皮质内参与DHA经酶代谢产生具有神经保护作用和抗氧化作用的NPD1的15-LOX和i PLA2蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),下调参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2、COX-1、COX-2、5-LOX和12-LOX蛋白表达(P<0.05或P<0.01);而DSS低剂量组只能明显上调海马内15-LOX和i PLA2蛋白的表达,下调海马、皮质内5-LOX和12-LOX的表达(P<0.05或P<0.01)和皮质内COX-1的表达(P<0.05)。与模型组相比,阳性药组、DSS高,中,低组均能AD模型小鼠海马、皮质内的神经炎症介质PGE2、TXB2和LTB4明显减少(P<0.05或P<0.01)。阳性药组、DSS高、中、低剂量组能使AD模型小鼠海马、皮质内的MDA、ROS明显降低(P<0.05或P<0.01),阳性药组、DSS高、剂量组均能使小鼠海马、皮质内的SOD活性增加(P<0.05);阳性药组、DSS高、中、低剂量组均能使小鼠海马、皮质内的GSH含量降低(P<0.05或P<0.01)(DSS中剂量皮质除外)。结论:当归芍药散水提液高、中、低剂量均能改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆障碍,改善血脂水平,能提高AD模型小鼠海马、皮质内未酯化DHA的含量并且上调DHA经酶代谢产生NPD1有关到15-LOX和i PLA2蛋白的表达,减少神经介质PGE2、TXB2和LTB4的生成,并且下调与神经介质生成有关的c PLA2、5-LOX、12-LOX、COX-1和COX-2蛋白的表达,并且还能改善AD模型小鼠脑内的氧化应激状态。