论文部分内容阅读
背景：多药耐药(multi-drug resistance，MDR)的形成是多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)复发和难治的主要原因，传统的MDR机制大都是从瘤细胞角度探讨问题，未充分考虑细胞基质微环境对瘤细胞耐药形成的影响。骨髓瘤细胞表面表达有多种细胞黏附分子，通过与其配体的特异性结合，介导细胞与细胞以及细胞与细胞外基质间的黏附；许多研究表明这种黏附能调节肿瘤细胞的存活与凋亡。细胞外基质成分纤维连接蛋白(fibronectin，FN)是多种细胞黏附分子的配体之一，鉴于此，本研究以人骨髓瘤RPMI 8226细胞为研究对象，探讨FN与细胞黏附分子受体的结合在MM耐药形成中的作用，以认识MM耐药的机理，并为临床逆转MDR提供新思路。 方法：结晶紫染色法观察FN与骨髓瘤RPMI 8226的黏附作用；噻唑蓝(MTT)法检测FN黏附前后化疗药物对RPMI 8226细胞的细胞毒作用；Annexin V FITC荧光标记分析比较FN黏附前后药物所致的靶细胞磷脂酰丝氨酸外化；流式细胞仪定量分析靶细胞内的亚二倍体DNA和 第四军医大学硕士学位论文一阿霉素的浓度；显微镜观察靶细胞的形态改变。 结果：骨髓瘤细胞与FN的动附作用明显高于对照组（OD：0．49 VS0刀3，P功力1）；FN能明显提高RP＊18226细胞耐受化疗药物的细胞毒作用，降低化疗的敏感性，FN N附前后阿霉素、拓扑替康、长春新碱的r。值（ZAs）分另为：323．3士20．9／1089．4士 127．4、98．6士8．5／512．7士 12．4和 564．9士 15．4／1599．5士 135．5 ng／mL；耐药指数分别为：3．4、5．2和2．8。显微镜观察，药物作用后的RPMI 8226细胞呈现出典型的凋亡特征，表现为细胞固缩、核染色质边集、凋亡小体形成。Annexin VFITC荧光标记分析，实验组ON）靶细胞的磷脂酚丝氨酸外化率低于对照组o动刀5），刚组靶细胞＊＊A在流式细胞仪中典型的亚二倍体峰也明显减弱，说明FN的动附抑制了药物导致的细胞早期凋亡；与此同时，流式细胞仪分析发现，FN＄附前后yMI 8226细胞内阿霉素浓度并未明显改变。 结论：＊）FN与 RI，MI 8226细胞的科附可使骨髓瘤细胞耐受化疗药物的细胞毒作用，诱导细胞耐药；（2）FN介导骨髓瘤细胞耐药的形成不同于传统的膜泵等机制，它是通过抑制化疗药物导致的细胞凋亡实现的。