第一部分靶向人小窝蛋白caveolin-1基因的shRNA真核表达质粒的构建及其在人脐静脉内皮细胞株HUVEC中的稳定表达目的：利用靶向人Cav-1基因的短发夹RNA（shRNA）真核表达质粒，转染人脐静脉内皮细胞HUVEC，并筛选出稳定转染的克隆细胞株。方法：针对Cav-1基因的mRNA序列设计并分别构建3个以shRNA质粒表达载体（pGPHI/Neo-Cav-1-homo526、pGPHI/Neo-Cav-1-homo548、pGPHI/Neo-Cav-1-homo781）和1个阴性对照质粒表达载体，采用脂质体法转染人脐静脉内皮细胞株HUVEC，G418筛选后，经免疫印迹和共聚焦显微镜分析HUVEC Cav-1的表达，选取抑制效应最强的一组，构建稳定表达Cav-1-shRNA的HUVEC细胞株（实验组）和稳定表达control-shRNA的HUVEC细胞株（载体对照组）。结果：稳定表达Cav-1-shRNA的HUVEC细胞株（实验组）命名为HUVEC^{cav-1-knowndown}，稳定表达control-shRNA的HUVEC细胞株（载体对照组）命名为HUVEC^{cav-1-control}。质粒稳定转染后检测HUVEC细胞中Cav-1的表达，免疫印迹和共聚焦显微镜结果提示，实验组中pGPHI/Neo-Cav-1-homo781抑制效果最好，其Cav-1蛋白的相对值为0.2199±0.0288，与阴性对照组和载体对照组相比显著降低（p<0.01），而阴性对照组和载体对照组间差异无统计学意义（p>0.01）。结论：成功构建低表达Cav-1的HUVEC细胞。第二部分基质细胞Cav-1表达影响骨髓瘤细胞对蛋白酶体抑制剂的敏感性目的：探讨基质Cav-1表达水平与多发性骨髓瘤对蛋白酶体抑制剂敏感性的影响。方法：采用间接共培养的方式将多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226分别与HUVEC、HUVEC^{cav-1-control}、HUVEC^{cav-1-knowndown}孵育不同时间，并以单独培养的RPMI8226、HUVEC、HUVEC^{cav-1-control}、HUVEC^{cav-1-knowndown}作为空白对照组，分别采用AnnexinV/PI、PI及单克隆抗体标记，流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期、活性氧及蛋白酶体抑制剂处理后的凋亡水平；蛋白印迹检测共培养后基质细胞Cav-1表达水平；半定量RT-PCR检测各组RPMI8226c-myc、stat mRNA表达的变化；MTT检测各组细胞硼替佐米的IC₅0。结果：与空白对照组RPMI8226相比，阴性对照组、实验组RPMI8226被阻滞在静息期，其G0/G1期细胞分别为28.49%、30.41%和36.15%，且c-myc、stat mRNA表达水平上调；RPMI8226、Cav-1表达下调均可诱导基质细胞的氧化应激，其ROS水平由80.4%上调至96.8%，氧化应激可诱导基质细胞Cav-1表达下调；肿瘤基质细胞、Cav-1表达下调参与调节RPMI8226对硼替佐米的敏感性，并抗氧化保护RPMI8226抗凋亡。结论：基质细胞Cav-1表达下调可保护肿瘤细胞抵抗凋亡，使其阻滞在静息期，介导多药耐药性。