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第一部分环孢菌素A人工抗原的制备目的制备环孢菌素A人工抗原,考察其相关特性。方法在环孢菌素A上连接化学活性基团,再与载体蛋白(牛血清白蛋白)偶联合成环孢菌素A人工抗原;用透析法纯化人工抗原;紫外扫描和SDS-PAGE鉴定偶联结果,计算环孢菌素A与载体蛋白的偶联比。结果制备出环孢菌素A人工抗原,紫外扫描和SDS-PAGE均显示环孢菌素A与载体蛋白偶联成功,环孢菌素A与载体蛋白的偶联比为18.3:1。结论成功制备出纯化环孢菌素A人工抗原。第二部分环孢菌素A多克隆抗体的制备目的制备环孢菌素A多克隆抗体,并考察环孢菌素A多克隆抗体的相关特性。方法用环孢菌素A人工抗原多次免疫动物,获得抗血清;盐析法纯化抗体;间接ELISA法测定抗体效价;IC50评价该抗体的特异性;考马斯亮蓝G-250法测定抗体的蛋白浓度。结果经5次免疫后获得环孢菌素A抗血清,抗体效价为1:16000;所得抗体与阿奇霉素,兰索拉唑,头孢拉定,氨溴索,格列本脲无明显交叉反应,纯化后的抗体蛋白浓度为1.367mg/ml。结论制备出纯化环孢菌素A多克隆抗体。第三部分:环孢菌素A血药浓度快速检测试纸的制备及验证目的制备环孢菌素A血药浓度快速检测试纸,考察试纸的相关特性,将试纸测定结果与TDX测定结果进行统计学比较,评价试纸的临床使用价值。方法将胶体金标记的环孢菌素A多克隆抗体,吸附在玻璃纤维素膜上,将人工抗原固化于适合的硝酸纤维素膜上,组装成检测试纸,优化工艺参数。考察试纸的灵敏度,精密度,检测范围,最低检测限,工作标准曲线,稳定性等指标。将试纸测定结果与TDX测得的结果进行比较,并做统计学分析。结果试纸对血清中环孢菌素A的检测范围为5-600ng/ml,标准曲线方程为A=-0.1903C+143.69,日内、日间精密度均小于25%,与阿奇霉素,兰索拉唑,头孢拉定,氨溴索,格列本脲无明显交叉反应。检测试纸检测结果与TDX检测结果间无显著差异(P>0.05)。结论初步研制出环孢菌素A血药浓度快速检测试纸,但其制备工艺及各项参数仍需要进一步研究和完善。