【摘 要】
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研究背景:围术期心肌缺血再灌注损伤发生率高,严重影响病人康复。既往研究表明心肌缺血再灌注后缺血区及周围心肌交感神经活性增加,相应部位自主神经支配失衡,而脊髓作为调控心脏功能的重要部位,在这一过程中的作用研究甚少。研究目的:本研究旨在通过转录组高通量测序技术,探讨6-羟多巴胺（6-OHDA）去交感神经支配对心肌缺血再灌注损伤后上胸段脊髓差异基因表达的影响。研究方法:选取健康成年雄性Sprague D
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研究背景:围术期心肌缺血再灌注损伤发生率高,严重影响病人康复。既往研究表明心肌缺血再灌注后缺血区及周围心肌交感神经活性增加,相应部位自主神经支配失衡,而脊髓作为调控心脏功能的重要部位,在这一过程中的作用研究甚少。研究目的:本研究旨在通过转录组高通量测序技术,探讨6-羟多巴胺（6-OHDA）去交感神经支配对心肌缺血再灌注损伤后上胸段脊髓差异基因表达的影响。研究方法:选取健康成年雄性Sprague Dawley大鼠（体重250-300g）,随机分为2组,即IR组（MIRI造模）和SD+IR组（去交感+MIRI组）。IR组称重后麻醉,气管插管后进行机械通气,于第四、五肋间开胸,用丝线结扎心脏冠状动脉左前降支,结扎时间为30min,松开结扎线后再灌注2h。SD+IR组连续3d腹腔注射6-OHDA（100mg/kg）,最后一次注射的第二天与IR组行相同的手术操作。再灌注结束后取心肌组织进行HE、Masson、Evans blue+TTC染色验证模型是否成功;取上胸段脊髓组织（T1-T4）,进行全转录组高通量测序,筛选差异表达mRNAs和部分非编码RNAs,并选取部分明显表达异常的基因进行实时荧光定量PCR验证。研究结果:（1）与SD+IR组相比,IR组HE、Masson染色可见心肌细胞排列不规则,其间有炎性细胞浸润和坏死心肌细胞。Evans blue+TTC染色显示IR组白色梗死心肌面积大于SD+IR组,差异有统计学意义（p=0.0053）。（2）按照一定的筛选标准（p1）,测序筛选出148个表达上调、51个表达下调mRNA,共计199个;165个表达上调,168个表达下调lncRNA,共计333个;70个表达上调,52个表达下调circRNA,共计122个;12个表达上调,11个表达下调miRNA,共计23个。差异基因GO富集分析结果表明与细胞组分相关的差异基因主要富集在细胞外、皮层细胞骨架等;与分子功能相关的主要富集在趋化因子活性等。信号通路分析表明差异基因主要集中在细胞因子及细胞因子受体相互作用、钠离子重吸收、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、粘多糖生物合成、cGMP-PKG信号通路、MAPK信号通路等。结论:化学性去交感神经具有心肌保护效应,上胸段脊髓中差异表达的基因和部分非编码RNA可能通过细胞因子及细胞因子受体相互作用、钠离子重吸收、半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、粘多糖生物合成、cGMP-PKG信号通路、MAPK信号通路等在这一保护效应中发挥作用,为干预心肌缺血再灌注损伤提供了新策略。
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