【摘 要】
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目的:禽白血病(AL)是危害禽类养殖业的重要传染病之一,引起禽类全身器官肿瘤性病变以及产生严重的免疫抑制等,给养鸡业造成严重危害。到目前为止,还没有发现对禽白血病有良好疗效的药物和疫苗。有报道砷制剂在人类白血病和禽类马立克氏病上具有治疗作用,但是砷制剂在禽白血病抗炎方面的防治作用研究鲜见报道。本论文通过研究砷制剂对禽白血病抗炎作用与机制,为寻求防治禽白血病病毒(ALV)的药物提供新思路。方法:对贵
【基金项目】
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贵州省科技计划项目:三氧化二砷对禽白血病Hedgehog信号通路影响的研究(黔科合支撑【2020】1Y136);
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目的:禽白血病(AL)是危害禽类养殖业的重要传染病之一,引起禽类全身器官肿瘤性病变以及产生严重的免疫抑制等,给养鸡业造成严重危害。到目前为止,还没有发现对禽白血病有良好疗效的药物和疫苗。有报道砷制剂在人类白血病和禽类马立克氏病上具有治疗作用,但是砷制剂在禽白血病抗炎方面的防治作用研究鲜见报道。本论文通过研究砷制剂对禽白血病抗炎作用与机制,为寻求防治禽白血病病毒(ALV)的药物提供新思路。方法:对贵州ALV-J流行株进行PCR鉴定和序列分析;将砷制剂作用于AL原代肿瘤细胞,检测肿瘤细胞中葡萄糖、乳酸、己糖激酶(HK)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)含量;用不同浓度砷制剂灌胃ALV感染的蛋鸡,采血称重,测脏器系数,肝脏病理学观察,检测血清中SOD、GSH-Px、MDA等抗氧化指标,炎症相关因子NO、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,TLR4/My D88/NF-κB信号通路基因TLR4、My D88、NF-κB和凋亡相关基因p53、p21、Bcl-2 m RNA表达情况,从分子水平研究砷制剂对AL的抗炎作用机制。结果:1.成功分离出一株ALV-J流行株,将其命名为GZCS01。对GZCS01进行gp85基因序列相似性分析,发现该流行株与安徽分离株BR2相似性最高,与国内其他J亚型分离株差异性不大。2.砷制剂作用于AL肿瘤细胞24 h和48 h时,肿瘤细胞中葡萄糖代谢量、乳酸生成量、HK和GLUT1含量显著下降(P<0.05)。3.鸡感染ALV后体重显著下降,心脏和肝脏系数显著升高(P<0.05);药物作用21 d时,砷制剂显著降低AL鸡肝脏系数(P<0.05)。4.21 d时,HE染色观察发现AL鸡肝脏内出现大量淋巴细胞浸润,1和2 mg/kg砷制剂可以减少AL鸡肝脏内淋巴细胞浸润。5.7 d、14 d和21 d时,与模型组相比,砷制剂显著升高AL鸡血清中SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05)。6.7 d、14 d和21 d时,与模型组相比,砷制剂显著降低AL鸡血清中NO含量、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平(P<0.05);显著下调IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达量(P<0.05)。7.与模型组相比,砷制剂显著抑制AL鸡肝脏中TLR4/My D88/NF-κB炎症信号通路基因TLR4、My D88、NF-κB m RNA表达水平(P<0.05)。8.与模型组相比,砷制剂显著降低凋亡相关基因p53、p21和Bcl-2 m RNA表达水平(P<0.05)。结论:砷制剂可以通过减弱AL原代肿瘤细胞Warburg效应发挥抗肿瘤作用;减少肝脏肿瘤的形成,增强体内抗氧化功能,抑制TLR4/My D88/NF-κB炎症信号通路的激活,下调炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,调整凋亡相关基因的表达,减轻ALV诱导的炎症反应。
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