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20世纪60年代末期,激素免疫学的产生为动物生殖调控提供了新思路。用外源性GnRH主动免疫动物,会刺激动物机体产生大量GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡的失调,改变下丘脑-垂体-性腺轴间的正常反馈调节关系,以减少生殖激素的合成和分泌及终止配子的发生,从而达到免疫去势的目的。GnRH主动免疫可避免外科阉割引起的动物高度应激、外科伤口容易感染,增加动物发病率甚至导致动物死亡等诸多不足,已成为最有望替代外科阉割的安全友好方法。本试验用蛋白结构修饰后的GnRH并列体二聚物(G6k-GnRH-Tandem-Dimer)与卵清蛋白偶联,以Specol为佐剂,主动免疫雄性藏绵羊,以研究其对雄性藏绵羊甲状腺功能的影响。试验选取24周龄、体重17-19 Kg的雄性藏绵羊30只,随机分为三组,每组10只。其中一组于25周龄时各只绵羊颈部皮下注射2 mLGnRH并列体二聚物卵清蛋白复合物(TDK-OVA)的Specol乳化剂(含TDK 100 μg),8周后加强免疫一次,注射剂量及方法同初次免疫,为免疫去势组。一组在试验开始前一周进行外科手术去势,为手术去势组。剩余一组不做任何处理,为完整对照组。初次免疫当天记为0 wpv。初免当天及初免后第4、8、12、16 wpv(即每4周1次,直至屠宰)颈静脉采集血样,酶联免疫法(ELISA)测定血清抗体滴度及LH、FSH、T、TSH、T3、T4含量变化。加强免疫后8周(即16 wpv),屠宰所有试验绵羊,分离下丘脑、垂体及两侧睾丸。Real-Time quantitative PCR分析下丘脑、垂体生殖相关基因(GnRH-R、TSH-β、TRH、TSH-R、MT1、MT2、DIO2、DIO3) mRNA表达变化。结果显示,免疫去势组产生了良好的抗体反应,初免后机体产生抗体,加免后血清抗GnRH抗体滴度快速升高,由加免当天的18.67%升高到12周(12 wpv)的最高峰(55.62%),后保持在较高水平,直至屠宰(48.85%)。与完整对照组相比,免疫去势组血清T含量显著下降(p<0.05),屠宰时仍维持在较低水平(4.27ng/mL).与完整对照组相比,手术去势组和免疫去势组血清T3和T4无显著下降(p>0.05),GnRH主动免疫显著下调绵羊垂体GnRH-R、TSH-β及下丘脑TRH、TSH-R、DI02mRNA表达水平(p<0.05),而手术去势组绵羊垂体GnRH-R mRNA表达水平显著高于免疫去势组和完整对照组(p<0.05)。屠宰时,完整对照组睾丸平均重量为51.71±7.58 g,平均体积为49.04±6.66 cm3,免疫去势组睾丸平均重量为41.58±5.77 g,平均体积为39.91±6.02 cm3。与完整对照组相比,免疫去势组藏绵羊睾丸发生萎缩,其重量及体积均下降到对照组睾丸的80%(p<0.05)上述研究结果表明:GnRH主动免疫尽管使下丘脑TRH、TSH-R、DI02、DI03及垂体TSH-β mRNA表达水平下调,但对血清中TSH、T3及T4浓度无明显影响。总之,GnRH主动免疫对雄性藏绵羊甲状腺功能无不利影响。