论文部分内容阅读
本试验主要观察“复方柴芩颗粒”对AFB1 (Aflatoxin B1,简写AFB1)引起的肉鸭肝损伤的部分药理作用,并从分子水平上探讨“复方柴芩颗粒”对AFB1慢性中毒时细胞色素P450酶的活性和mRNA及蛋白表达的影响。主要试验内容及结果如下：试验方法健康1日龄樱桃谷肉鸭126只,饲喂试验基础日粮6天,于第7天(肉鸭7日龄)时,随机选取21只肉鸭作为正常组,继续饲喂实验基础日粮。其余105只肉鸭,每天饲喂含40μg/kg AFB1的饲料,建立肉鸭AFB1慢性中毒模型,同时分为模型组、阳性对照组、“复方柴芩颗粒”高剂量组、“复方柴芩颗粒”中剂量组、“复方柴芩颗粒”低剂量组,每组21只。本试验共六组,造模和用药同时进行,选取造模(用药)7 d、14 d和21 d为3个时间点,六个组每组分别随机选取7只肉鸭,取血和肝脏。检测血清氧化应激指标(SOD、MDA)、肝脏损伤标志性指标(AKP、GOT、GPT)、观察肝脏组织的病理变化。取2g肝组织制备肝微粒体,检测肝微粒体中CYP3A4、 CYP1A2和CYP2E1活性以及肝标本中CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表达水平。取黄豆粒大小的肝组织,用于检测CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA表达量。试验结果结果显示,同模型组相比,用药三个时间点“复方柴芩颗粒”高、中、低剂量组,血清中丙二醛(MDA)含量、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活力显著降低(P<0.05);超氧化物歧化酶(SOD)显著升高(P<0.05)；肝组织空泡化降低、胆管增生现象较轻。综合考虑投药14d,各项指标更接近正值。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7d和14 d,肝脏微粒体细胞色素P450酶系CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性显著降低(P<0.05)；用药21d“复方柴芩颗粒”三个治疗组CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高(P<0.05),但与模型组相比差异不明显。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7d、14d和21d,肝脏CYP3A4、 CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。与模型组相比,“复方柴芩颗粒”三个治疗组用药7 d、14 d和21d,CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。用药7d和14d CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量和蛋白表达量明显低于用药21d的表达量(P<0.05),且低剂量组数据显著高于高、中剂量组(P<0.05)。试验结论：1.“复方柴芩颗粒”能有效的防治肉鸭AFB1慢性中毒,主要通过调节肉鸭的抗氧化功能、提升肝功能来实现的。且投药14 d药效最好。所以综合考虑,优选出最佳用药方案,即低剂量用药14d。2.用药7、14d,“复方柴芩颗粒”能有效抑制由AFB]导致的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性升高的趋势,减少AFB1前体物质代谢激活,降低其化学性肝脏损伤达到保护肝脏的作用。用药21d CYP450活性升高,可能与“复方柴芩颗粒”本身具有升高CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1活性的作用,但其诱导效果远远低于AFB1,且只是随着时间推移逐渐显现出来有关。3.“复方柴芩颗粒”能有效抑制由AFB1引起的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高的趋势,从而减少AFB1前体物质代谢激活,降低AFB1引起的化学性肝脏损伤,进而达到保护肝脏的作用。但随用药时间增加,治疗组三种基因型表达量逐渐升高,进而证明“复方柴芩颗粒”本身很有可能具有一定的诱导CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1的作用,但其诱导效果只是随着时间推移逐渐显现出来。