犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）是细小病毒科、细小病毒属的成员,是感染犬科类动物的重要病原之一。犬感染CPV后引发严重的腹泻,并伴随出现食欲减弱、呕吐、发烧和白细胞减少等症状,不仅对犬科类动物产生非常大的危害,而且严重阻碍我国养犬业的健康发展。由于该病毒容易变异,临床中易出现免疫失败,因此对该病毒不同分离株的研究将对控制犬细小病毒病具有重要的意义。为了解上海地区CPV的流行及变异情况,从疑似CPV感染的死病犬的组织中分离到一株犬细小病毒,命名为CPV-SH15。病毒血凝效价为2⁹,病毒TCID₅₀为10^5.2/mL,病毒基因序列全长4 869 bp,分析病毒VP2基因的氨基酸序列后,确定本分离毒株是new CPV-2a型。为研究CPV感染MDCK细胞后的增殖规律,本研究建立检测CPV的SYBR-Green实时荧光定量PCR法。该法能够最低检测至1.29×10²拷贝/μL的犬细小病毒量,变异系数（Coefficient of Variation,CV）小于1%,且对其它病毒未能检测出阳性。CPV感染MDCK后的增殖动态显示,在60⁷2 h病毒量达到峰值。为探究CPV感染MDCK细胞后诱导细胞凋亡机制的情况。首先对CPV感染后的MDCK细胞进行双染检测。发现CPV能够诱导MDCK细胞凋亡。在设定的多个时间点使用建立的荧光定量PCR,分别对收集的细胞液进行细胞凋亡因子如caspase-8、caspase-9和caspase-12等mRNA表达水平的检测。结果表明:caspase-8与caspase-12被激活,表明细胞凋亡存在死亡受体途径和内质网途径,caspase-9的活化以及Bax/Bcl2比值的增加表明了线粒体途径也参与其中。同时p53的活化,或许是通过调节Bax与Bcl2的上调或下调的变化继而介导细胞凋亡。综上所述,本研究分离鉴定到一株CPV-SH15,获得全基因组并确立抗原分型;建立特异性和灵敏性较高的荧光定量PCR检测法;探究CPV感染MDCK细胞后诱导细胞凋亡的机制。为进一步研究CPV-SH15提供了基础理论支撑。