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目的:探讨米非司酮(MIF)联合三氧化二砷(As2O3)对K562/ADM细胞的逆转作用及机制研究,为MIF联合As2O3在难治性急性白血病中的临床应用提供实验依据。方法:采用甲基四氮唑盐(MTT)法、AnnexinV/PI标记法、RT—PCR法、分光光度法检测经MIF、As2O3、MIF联合As2O3处理K562/ADM细胞72h前后的细胞增殖抑制作用、凋亡率、MRP表达水平、谷胱甘肽含量的变化。结果:1、As2O3浓度在1.0umol/L时K562/ADM细胞未见明显的抑制作用。在2.0umol/L抑制作用很小(15.69±3.56%),当浓度≥4umol/L其抑制作用明显加强,并随剂量加大作用加强,P<0.05。2、MIF浓度在0-10umol/L对K562/ADM细胞未见明显的增殖抑制作用,当药物浓度>10umol/L其抑制作用明显加强,并随剂量加大作用加强,P<0.05。3、MIF、As2O3及MIF联合As2O3对K562/ADM细胞均有一定的逆转耐药作用,逆转倍数分别为2.32,1.86,3.92倍,且ADM浓度在1.25-10.0范围内MIF联合As2O3的逆转作用较同浓度单用药组作用明显增强,P<0.05。4、浓度为10umol/LMIF可以诱导K562/ADM细胞凋亡,其凋亡率为26.38±2.59%,2.0μmol/LAs2O3作用后,凋亡率为20.13±3.56%。MIF联合As2O3共同作用于K562/ADM细胞,凋亡率为:37.03±3.59%,与同浓度单用药组,其诱导凋亡率明显升高,P<0.05。5、K562细胞中GSH含量为48.32±9.26g/L, K562/ADM细胞中为79.22±4.60g/L,耐药细胞产生的GSH含量明显高于敏感细胞,P<0.01。MIF单独作用于耐药细胞GSH含量为53.58±3.17g/L,联合组作用于耐药细胞GSH含量为53.08±6.02g/L,两者之间相比,P>0.5,两者与耐药细胞未加药组相比,P<0.01。As2O3单独作用于耐药细胞GSH含量为77.05±4.54g/L,与耐药细胞未加药组相比,P>0.5,与联合组相比,P<0.01。6、K562/ADM细胞MRP基因的表达(0.98±0.11)明显高于K562细胞(0.20±0.07),P<0.01。联合组分别与MIF、As2O3单药组相比, K562/ADM细胞MRPmRNA/β-Action比值明显降低,P<0.01。三者与对照组相比,其MRPmRNA /β-Action比值明显降低,P<0.01。结论:1、As2O3浓度在0-2umol/L时,对K562/ADM细胞的增殖抑制不明显,当浓度≥4umol/L时对K562/ADM细胞有明显抑制作用。2、MIF浓度在0-10umol/L对K562/ADM细胞的增殖抑制不明显,当药物浓度>10umol/L时对K562/ADM细胞有明显抑制作用。3、MIF和As2O3均能逆转K562/ADM细胞的耐药性,二者联合逆转作用明显增强。4、MIF和As2O3均能诱导K562/ADM细胞凋亡,二者联合诱导凋亡明显增强。5、K562/ADM细胞中GSH的含量明显高于K562细胞,MIF可明显降低K562/ADM细胞中GSH的含量。6、K562/ADM细胞高表达MRP,MIF、As2O3均能抑制K562/ADM细胞中MRP表达,两者联合抑制效果更明显。7、MIF联合As2O3应用逆转耐药作用增强,其机制可能与凋亡加强,GSH的含量降低、MRP表达抑制有关。