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目的:观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、背根神经节和脊髓内TNF-α和SP的表达变化及吗啡、曲马多、酚妥拉明、艾司洛尔、阿托品预先给药的干预效应,探讨(1)TNF-α和SP在心肌缺血伤害性刺激诱发机体神经源性反应机制中的作用及机理;(2)局部心肌急性缺血诱发整体心肌损伤的机制;(3)痛觉干预在缺血心肌保护中的作用及机制。方法:第一部分:TNF-α和SP的表达变化实验选用雄性SD大鼠随机分为三组:(1)动物对照组(Control group, C组),麻醉后直接取材;(2)手术对照组(Sham group, S组),只开胸不结扎冠脉;(3)结扎冠状动脉组(Coronary artery occlusion group, CAO组),单纯扎闭冠状动脉左前降支。其中,Sham组和CAO组又分为八个时点的亚组:0.5h组、1h组、3h组、6h组、1day组、2day组、3day组、7day组。采用免疫组化和ELISA技术观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、背根神经节和脊髓内TNF-α和SP的表达变化;第二部分:TNF-α和SP的表达变化的干预研究根据第一部分实验结果,分别选取CAO后TNF-α和SP表达最强的时点进行药物干预研究。采用雄性SD大鼠随机分为八组:(1)动物对照组(Control group, C组);(2)手术对照组(Sham group, S组);(3)结扎冠状动脉组(Coronary artery occlusion group, CAO组);(4)吗啡预处理组(Morphine group, M组);(5)曲马多预处理组(Tramadol group, T组);(6)酚妥拉明预处理组(Rigitine group, R组);(7)艾司洛尔预处理组(Esmolol group, E组);(8)阿托品预处理组(Atropine group, A组)。各药物干预组分别在结扎左冠状动脉前15min经尾静脉给予吗啡1.25mg.kg-1、曲马多12.5mg.kg-1、酚妥拉明0.4mg.kg-1、艾司洛尔3.0mg.kg-1、阿托品1.0mg.kg-1。采用免疫组化、ELISA和Real Time RT-PCR技术观察各药物的干预效应。结果:(1)CAO后大鼠心肌、背根神经节及脊髓TNF-α水平较对照组显著升高,心肌TNF-α在CAO1h达高峰,背根神经节及脊髓TNF-α在CAO0.5h达高峰;血运阻断区心肌TNF-α水平较非血运阻断区心肌显著升高;背侧和腹侧脊髓TNF-α水平比较无显著性差异;各药物干预组TNF-α水平明显低于CAO组,各药物干预组之间TNF-α水平无显著性差异。(2)CAO后大鼠心肌、背根神经节及脊髓SP水平较对照组显著升高,心肌、背根神经节及脊髓SP在CAO3h达高峰;血运阻断区心肌SP水平较非血运阻断区心肌显著升高;背侧脊髓SP水平较腹侧脊髓显著升高;各药物干预组SP水平明显低于CAO组,各药物干预组之间SP水平无显著性差异。(3)在心肌组织和背根神经节,CAO组TNF-αmRNA和SPmRNA的表达水平均较对照组显著升高(P<0.05),各药物干预组明