自噬诱导对大肠癌细胞放射敏感性的影响

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目的:研究增加大肠癌细胞自噬水平对其放射敏感性的影响,并初步探讨其可能机制,为大肠癌放射增敏研究提供一定研究基础。方法:雷帕霉素处理CCL-244细胞,采用单次放射剂量4Gy辐照,设立对照组(NC组)、雷帕霉素处理组(RAP组)、照射组:单纯照射组(IR)、雷帕霉素照射组(RAP+IR)。利用CCK-8试验和细胞划痕实验观察不同干预对大肠癌细胞增殖与迁移能力的影响;通过观察辐照后大肠癌细胞克隆形成能力、细胞凋亡等变化探讨自噬对CCL-244细胞放射敏感性的影响;Western blot、免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3和Beclin-1的表达情况。结果:4Gy剂量辐照后,雷帕霉素组CCL-244细胞增殖能力明显受到抑制,并且细胞迁移能力明显增强;克隆实验显示,4Gy照射后,雷帕霉素组细胞克隆数形成最少;在凋亡试验中,雷帕霉素组细胞凋亡率为7.93%,照射组细胞凋亡率为3.69%,二者差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,雷帕霉素处理细胞自噬蛋白表达上调,给予单剂量4Gy照射后,细胞自噬蛋白LC3和Beclin-1表达明显上调。结论:雷帕霉素上调大肠癌细胞自噬活性,可提高大肠癌细胞的放射敏感性。诱导大肠癌细胞自噬,有望成为肿瘤放射增敏治疗的靶点,值得进一步深入研究。
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