卑霉素产生菌的菌种选育和发酵工艺研究

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卑霉素为正糖霉素族的寡糖类抗生素,是一种新型消化促进剂,以其高效、低毒和低残留在畜牧业上有着广阔的应用前景。本文研究的主要目的是通过对卑霉素产生菌绿色产色链霉菌(AS4.126)菌种选育和发酵工艺优化,得到几株高产菌株,以不断提高卑霉素产量,为实现我国饲料工业的高效、优质和低耗做出积极的探索。根据卑霉素的生物合成途径和代谢调控原理,运用紫外线、微波和亚硝酸等多种诱变因子进行菌种诱变,并结合理化选育和自然筛选,筛选得到抗自身产物的突变株。经过诱变筛选,选育出了卑霉素高产菌株TN-29,发酵单位为65u/mL,比出发菌株绿色产色链霉菌提高了2.7倍。对菌株TN-29进行了遗传稳定性试验,经过5次传代后,结果表明,该菌株具有良好的遗传稳定性。利用正交实验方法优化液体种子培养基的配方,通过单因素实验研究了孢子接种龄和接种量对种子生长的影响。优化的液体种子培养条件是:1)培养基配方:蛋白胨:2%,豆饼粉3.2%,甘露醇1.4%,葡萄糖0.5%,硫酸铵0.64%,MgSO4 0.005% ,NaCl0.5%;2)孢子龄84h,接种量为1.95亿个/50mL,种子液DNA含量最高,最大值可达0.693g/ml。分别利用全因子试验、最陡爬坡试验和响应面法优化TN-29发酵培养基配方,并通过单因素实验研究了孢子接种龄和接种量对卑霉素产量的影响。优化的发酵培养基配方为:豆饼粉为3.61%,甘露醇为2.99%,葡萄糖为0.58%,可溶性淀粉0.64%,硫酸铵0.25%,硫酸镁0.005%,CaCO3 0.5%, PH值7.2~7.4;优化的发酵条件是:摇床转速200r/min、摇瓶装量50ml/500ml、温度28℃、发酵周期40h。在优化的培养条件的培养,发
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