论文部分内容阅读
山茱萸(Corni Fructus)为山茱萸科(Cornaceae)山茱萸属(Cornus)植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)的干燥成熟果肉,是我国传统的名贵中药材。由于目前市场流通的山茱萸药材质量参差不齐,难以保证山茱萸道地性和药材的品质功效,导致不同产地的山茱萸药材品质各异。因此研究不同产地山茱萸成分的差异,揭示山茱萸道地性的成因,对控制山茱萸药材质量非常关键。本研究以采自浙江、陕西、河南、甘肃、山西、安徽、四川7个省份29批次山茱萸药材和其栽培土壤为材料,对山茱萸样品的杂质、水分、灰分、浸出物、有效成分和无机元素进行研究分析,并结合其栽培土壤的理化性质、无机元素含量、真菌多样性进行综合分析,探究不同产地山茱萸药材的品质差异及其道地性产生的原因,旨在为山茱萸的规范化种植、质量控制、开发利用提供理论依据和技术支撑。主要研究内容和结果如下:1.不同产地山茱萸药材的质量测定按照《中国药典》(2015版第四部)检查方法项下的规定对山茱萸样品的杂质、水分、灰分和浸出物含量进行检测。结果显示,山茱萸药材样品中含杂质0.63%~2.87%,水分7.30%~13.07%,总灰分4.00%~6.91%,水溶性浸出物44.87%~5 8.96%,表明不同产地山茱萸药材样品中各项指标性含量均有差异。按照《中国药典》(2015版)规定,29个产地中样品合格率为76%。2.不同产地山茱萸多种有效成分含量的测定分析采用高效液相色谱法(HPLC)对采自不同产地的山茱萸果肉中没食子酸、原儿茶酸、5-HMF、莫诺苷、马钱苷、獐芽菜苷和山茱萸新苷七种有效成分进行了测定分析。结果表明,七种有效成分含量分别为莫诺苷10.326~25.785 mg/g、马钱苷4.539~12.287 mg/g、山茱萸新苷 1.198~2.930 mg/g、獐牙菜苷 0.815~1.844 mg/g、没食子酸 0.179~1.458 mg/g、5-HMF 0.361~1.237 mg/g、原儿茶酸 0.064~0.527 mg/g。以有效成分含量高低作为判断山茱萸质量优劣标准时,各产区质量差异较大,陕西、河南等道地产区山茱萸质量优势明显。3.不同产地山茱萸药材及其栽培土壤中无机元素的测定分析采用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)对山茱萸及其栽培土壤的14种无机元素含量进行测定分析。结果表明不同产地的山茱萸药材样品中14种无机元素含量均有一定差异,相邻产区的不同样品之间差异相对较小。药材元素含量总和较高的多数样品均来自于道地产区陕西省和河南省。不同产地山茱萸栽培土壤样品中14种无机元素的含量由高至低依次为Fe>K>Ca>Na>Mg>Mn>Zn>Cr>Cu>Ni>Pb>As>Cd>Hg。山茱萸药材对土壤中不同金属元素的富集能力不同,由强到弱依次为 K>Ca>Mg>Pb>Zn>Cu>Hg>As>Cd>Cr>Ni>Fe>Na>Mn。4.不同产地土壤因子对山茱萸药材质量的影响通过测定不同产地山茱萸栽培土壤的酸碱度、硝氮含量、氨氮含量、磷酸盐含量、脲酶活性和磷酸酶活性等相关因子,分析这些因素与山茱萸有效成分含量的相关性。结果显示,29份土壤样品中酸碱度范围为7.043~8.020,硝氮的含量范围为0.6193~2.2197 mg/kg、氨氮的含量范围为0.1930~9.6203 mg/kg、磷酸盐的含量范围为0.0590~5.1103 mg/kg,脲酶的活性范围为1.0849~11.3877 mg/g、磷酸酶的活性范围为0.0380~0.2294 mg/g。通过相关性分析可以看出,不同产区山茱萸药材的有效成分含量与其对应土壤因子具有一定相关性。酸碱度与莫诺苷含量存在显著正相关;硝氮含量与马钱苷、獐牙菜苷含量存在极显著正相关,与没食子酸含量存在显著正相关;氨氮含量与獐牙菜苷含量存在显著正相关。5.不同产地山茱萸栽培土壤真菌群落多样性分析通过不同产地山茱萸栽培土壤样品的高通量测序,对其真菌菌落组成、真菌多样性、真菌相对丰度分布等进行分析研究。结果显示山茱萸栽培土壤样品中真菌分属于11个门、24个纲、71个目、151个科、267个属、共280个种,真菌群落多样性与丰富度均表现出一定的差异性,且道地产区陕西地区和河南地区在真菌群落多样性分析结果上有一定的一致性,说明土壤真菌微生物的多样性与山茱萸的道地性成因有着密切的关系。