【摘 要】
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目的:研究脐血来源树突状细胞(DC)的体外扩增培养及诱导特异性抗卵巢癌细胞的免疫效应.方法:①从脐血中分离单个核细胞后,获得单核细胞(M0).以粒-单集落刺激因子(GM-CSF)、白
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目的:研究脐血来源树突状细胞(DC)的体外扩增培养及诱导特异性抗卵巢癌细胞的免疫效应.方法:①从脐血中分离单个核细胞后,获得单核细胞(M0).以粒-单集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)、干细胞刺激因子(SCF)和酪氨酸激酶受体家族Ⅲ的配体(Flt-3L)分两组诱导分化扩增,共培养7天后应用流式细胞仪进行表型分析;共培养14、21天后分别手工记数DC细胞;②诱导单核细胞分化的第3天加入人卵巢癌细胞株SKOV3的冻融抗原,共培养4天后获得负载肿瘤抗原的成熟DC;将致敏的DC与从脐血中分离的同种同体T淋巴细胞共培养6天,获得细胞毒T淋巴细胞(CTL);四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对人卵巢癌细胞株SKOV3、人肝癌细胞株Hu-7的细胞毒作用;同时,分别用MTT法检测未经SKOV3致敏的DC与T淋巴细胞共培养后的T细胞以及单核细胞对卵巢癌细胞株SKOV3的杀伤作用;结果:①脐血来源M0在不同细胞因子组合的作用下,7天后可分化生成成熟的DC,高表达特异性抗原CD83、CD86、CD80、CD1a;且SCF和Flt-3L可明显增加DC的细胞数量;②DC可负载并提呈肿瘤抗原,诱导肿瘤特异性CTL的产生,不同浓度的CTL对卵巢癌细胞株SKOV3有特异性杀伤、抑制作用(P<0.05).结论:脐血中的DC前体细胞(即单核细胞)可在体外分化扩增为成熟的功能性DC,并可诱导出特异性杀伤卵巢癌细胞的免疫效应,是一种临床应用前景良好的、方便有效的肿瘤免疫治疗方法.
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