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目的:研究中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophilgelatinaseassociatedlipocalin,NGAL)和肾损伤分子-1(Kidneyinjurymolecules-1,KIM-1)在内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致大鼠急性肾损伤(acutekidneyinjury,AKI)早期的表达变化。
方法:健康雄性Wistar大鼠32只随机分为4组:
正常对照组:大鼠尾静脉注射1ml生理盐水;
LPS2h、4h、6h组:LPS剂量为5mg/kg体重,生理盐水稀释至1ml尾静脉注射,复制AKI模型。
造模后分别在2h,4h,6h时间点留取标本,酶联免疫吸附法(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测大鼠血清和尿液中NGAL的含量及尿液和肾组织中KIM-1的含量,除蛋白法测定血肌酐(serumcreatinine,Scr)和尿肌酐(urinecreatinine,Ucr)值并比较各组大鼠光镜下肾脏的病理改变。
结果:
1.各组Scr的测定:LPS2h组较对照组上升幅度小(P>0.05),LPS4h,6h组较对照组显著升高(P<0.01),LPS组各组之间比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);
2.各组Uer的测定:LPS2h组较对照组下降幅度小(P>0.05),LPS4h,6h组较对照组显著下降(P<0.01),LPS4h组较LPS2h组显著下降(P<0.01),LPS6h组较LPS4h组下降幅度小,相比差异无统计学意义(P>0.05);
3.各组血清和尿液中NGAL水平的变化:LPS各组较对照组显著升高(P<0.01),LPS4h组较LPS2h组升高幅度小(P>0.05),LPS组各组之间的差异均具有统计学意义(P<0.01);
4.各组尿液和肾组织匀浆中KIM-1水平的变化:LPS各组较对照组显著升高(P<0.01),尿液中LPS4h组较LPS2h组上升幅度较小(P<0.05),其余LPS2h,4h,6h组各组之间的差异均具有统计学意义(P<0.01);
5.病理片对照:对照组肾小球和肾小管结构正常,近曲小管管壁充盈,胞质丰富,胞核蓝染,边界清晰;LPS2h组肾小球基本正常,部分肾小管上皮细胞轻微肿胀,细胞核淡染;LPS4h组部分肾小球充血,肾球囊轻度扩张,肾近曲小管上皮明显肿胀,肾小管间质呈充血现象,炎性细胞浸润;LPS6h组各种病理表现均较LPS4h组明显加重。
结论:NGAL和KIM-1在AKI早期即出现升高,可作为AKI的早期诊断指标,并且KIM-1有明显的时间依赖性,可作为病情监测指标。